Chapitre II : Matériel et méthodes
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 Test présomptif :
Les bactéries sont ensemencées sur le milieu gélosé Slanetz, puis incubées à 37°pendant 24h,
les entérocoques se caractérisent par des colonies rouges ou roses.
La gélose Slantez : contient de l’azide de sodium qui sélectionne les bactéries à Gram positif
par inhibition des microorganismes à Gram négatif,
La réduction de TTC (chlorure de 2, 3,5 triphényltétrazolium) par les bactéries donne une
coloration rouge à rose.
 Test confirmatif :
Deux à trois bactéries issues des colonies rouges à roses sont ensemencées dans le milieu BEA
(gélose bile Esculine Azide). Après incubation à 37°pendant 24h, l’apparition de colonies
noires confirme que ces bactéries sont des entérocoques.
La gélose BEA est un milieu sélectif destiné à l’isolement des entérocoques et des streptocoques
fécaux.
La bile : permet la croissance des entérocoques par l’inhibition des autres bactéries à Gram
positif. (Madjmaa et Boulmaize ,2016)
L’esculine : les entérocoques hydrolysent l’esculine en aglycone en présence de sel de fer qui
va donner des colonies noires sur la surface de la gélose. (Madjmaa et Boulmaize ,2016)
L’azide de sodium : supprime la croissance des bactéries à Gram négatif (Madjmaa et
Boulmaize ,2016)
Plusieurs ré- isolement ont été effectué pour obtenir des bactéries pures.