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- Principe de la méthode
Le test biologique sur souris consiste en l'injection intrapéritonéale, à des souris de 20
grammes, d'un extrait acide de l'échantillon. Le temps écoulé entre la fin de l'injection et la
mort de la souris est mesuré précisément : c'est le « temps de survie ».
Le temps de survie est ensuite exprimé en Unités-Souris à l'aide de la table de Sommer
annexe II. Une Unité-Souris est définie comme la quantité de toxine qui, injectée par voie
intrapéritonéale, tue une souris de 20 g en 15 minutes. Les Unités-Souris sont converties en
μg équiv. - STX à l'aide d'un Facteur de Conversion (FC) mesuré lors de l'étape préliminaire
de standardisation du test annexe III.
- Protocole d’extraction
Nettoyage et récupération de la chaire des coquillages, L’extraction s’effectue sur
100g de broyat.
Ajout d’HCl 0.1 N, vérifier le ph qui doit être aux alentours de 3 et l’ajuster si
nécessaire.
Porter le broyat à ébullition douce sous agitation permanente Refroidir et vérifier le
pH qui doit être aux alentours de 3, ajuster si nécessaire.
Transvaser l'extrait dans une éprouvette et Compléter à 200 ml avec de l'eau
distillée.
Centrifuger le mélange pendant 15 minutes à 3000 tours / min.
Récupérer le surnageant et le conserver dans des pots résistants à la congélation.
- Principe de la méthode
Le test biologique sur souris consiste en l'injection intrapéritonéale, à des souris de 20
grammes, d'un extrait acide de l'échantillon. Le temps écoulé entre la fin de l'injection et la
mort de la souris est mesuré précisément : c'est le « temps de survie ».
Le temps de survie est ensuite exprimé en Unités-Souris à l'aide de la table de Sommer
annexe II. Une Unité-Souris est définie comme la quantité de toxine qui, injectée par voie
intrapéritonéale, tue une souris de 20 g en 15 minutes. Les Unités-Souris sont converties en
μg équiv. - STX à l'aide d'un Facteur de Conversion (FC) mesuré lors de l'étape préliminaire
de standardisation du test annexe III.
- Protocole d’extraction
Nettoyage et récupération de la chaire des coquillages, L’extraction s’effectue sur
100g de broyat.
Ajout d’HCl 0.1 N, vérifier le ph qui doit être aux alentours de 3 et l’ajuster si
nécessaire.
Porter le broyat à ébullition douce sous agitation permanente Refroidir et vérifier le
pH qui doit être aux alentours de 3, ajuster si nécessaire.
Transvaser l'extrait dans une éprouvette et Compléter à 200 ml avec de l'eau
distillée.
Centrifuger le mélange pendant 15 minutes à 3000 tours / min.
Récupérer le surnageant et le conserver dans des pots résistants à la congélation.
