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- Protocole d’extraction
Les figures illustrant la manipulation sont répertoriées en annexe I
II.8.2. Dosage des toxines paralysantes (PSP)
La méthode décrite est adaptée de AOAC (Official Methods of Analysis), 1990, par Ledoux
M. et Murail I in Belin.C et al, (1996).
C’est la méthode biologique de référence de détection des toxines PSP. C'est en effet une
méthode fiable, et donnant des résultats comparables, car elle comprend le calcul d'un
coefficient de correction.
- Domaine d’application
Cette méthode permet de déterminer la teneur globale en phycotoxines paralysantes d'un
extrait de chair totale de coquillages. Elle ne permet pas de quantifier individuellement
chaque toxine. La toxicité est exprimée en μg d'équivalent saxitoxine (μg équiv. - STX) pour
100 g de chair.
Nettoyage des coquillages et récupération des glandes, L’extraction s’effectue sur 20 g de
glande digestive.
Après Broyage et homogénéisation On effectue deux extractions successives avec une
solution de 60ml de méthanol/eau 80/20 après filtration on continue l’extraction sur le
surnageant
On effectue deux extractions successives liquide/liquide avec une solution hexane avec
la phase méthanol
Ajouter à la phase aqueuse 20 ml d’eau distillée et on effectue deux extractions
liquide/liquide avec du dichlorométhane
Après filtration on continue l’extraction sur le surnageant
Evaporer le dichlorométhane, entre 30 et 40°C, avec le rotavapeur équipé d'une pompe
à vide
Reprendre le résidu obtenu dans le Tween 20 à 1%.