Chapitre III : Matériels et méthodes 2023
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Les nitrites (NO2-) forment un diazoïque par action avec la sulfanilamide en milieu acide
pH<2. Ce composé formera ensuite en présence de N-naphtylethylénediamine un composé
azoïque de couleur rose absorbant la lumière à 540 nm (Benschneider, Robinson, 1952,
Skalar, 1998).
b. Dosage des nitrates :
La méthode est basée sur la réduction des nitrates (NO 3
-
) en nitrites (NO 2
- ) par le passage de
l’échantillon à travers une colonne réductrice de cadmium traité au cuivre (Wood, 1967).
Les nitrites (en réalité NO 2 - + NO 3 - réduits) seront ensuite dosés par colorimétrie selon la
méthode précédemment décrite. Il suffira alors d’en déduire la concentration des nitrites
déterminés directement (sans passage de l’échantillon sur la colonne réductrice) pour trouver
les concentrations des nitrates (Rodier et al, 1996).
c. Dosage des orthophosphates :
En présence d’antimoine tartrate de potassium à une température de 40° C (bain-marie), les
ions orthophosphates (PO 4
3) réagissent avec le molybdate d’ammonium pour former un
complexe antimoine phosphomolybdique qui sera réduit par l’acide ascorbique (Murphy,
Riley, 1962).
Cette forme réduite de coloration bleue a un maximum d’absorption à 880 nm.
d. Dosage du silicium dissous :
Dans l’eau de mer, le silicium dissous se trouve à 95 % sous forme d’acide orthosilicique
Si(OH) 4 (Aminot, Chaussepied, 1983).
Cette forme réagit avec le molybdate d’ammonium en milieu acide pour former un complexe
silicomolybdique qui sera réduit par l’acide ascorbique en un composé coloré en bleu
absorbant à 810 nm. On y ajoute l’acide oxalique pour éviter les interférences des phosphates.
Etalonnage : Cette opération nécessite la préparation d’une solution mère puis de
solutions filles pour chaque élément à analyser (voir annexe IV.1.1).
Les droites d’étalonnage sont établies automatiquement par le logiciel en utilisant les
concentrations connues des solutions étalons et leurs hauteurs de pic correspondantes.
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Les nitrites (NO2-) forment un diazoïque par action avec la sulfanilamide en milieu acide
pH<2. Ce composé formera ensuite en présence de N-naphtylethylénediamine un composé
azoïque de couleur rose absorbant la lumière à 540 nm (Benschneider, Robinson, 1952,
Skalar, 1998).
b. Dosage des nitrates :
La méthode est basée sur la réduction des nitrates (NO 3
-
) en nitrites (NO 2
- ) par le passage de
l’échantillon à travers une colonne réductrice de cadmium traité au cuivre (Wood, 1967).
Les nitrites (en réalité NO 2 - + NO 3 - réduits) seront ensuite dosés par colorimétrie selon la
méthode précédemment décrite. Il suffira alors d’en déduire la concentration des nitrites
déterminés directement (sans passage de l’échantillon sur la colonne réductrice) pour trouver
les concentrations des nitrates (Rodier et al, 1996).
c. Dosage des orthophosphates :
En présence d’antimoine tartrate de potassium à une température de 40° C (bain-marie), les
ions orthophosphates (PO 4
3) réagissent avec le molybdate d’ammonium pour former un
complexe antimoine phosphomolybdique qui sera réduit par l’acide ascorbique (Murphy,
Riley, 1962).
Cette forme réduite de coloration bleue a un maximum d’absorption à 880 nm.
d. Dosage du silicium dissous :
Dans l’eau de mer, le silicium dissous se trouve à 95 % sous forme d’acide orthosilicique
Si(OH) 4 (Aminot, Chaussepied, 1983).
Cette forme réagit avec le molybdate d’ammonium en milieu acide pour former un complexe
silicomolybdique qui sera réduit par l’acide ascorbique en un composé coloré en bleu
absorbant à 810 nm. On y ajoute l’acide oxalique pour éviter les interférences des phosphates.
Etalonnage : Cette opération nécessite la préparation d’une solution mère puis de
solutions filles pour chaque élément à analyser (voir annexe IV.1.1).
Les droites d’étalonnage sont établies automatiquement par le logiciel en utilisant les
concentrations connues des solutions étalons et leurs hauteurs de pic correspondantes.