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Collectoin PCEM / BIOCHIMIE 1
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—
un pentapeptide de séquence :
_
@
H2N
COOH
—
et un tétrapeptide de séquence :
/CYS—PRO—ARG—GLY\
_
@
H2N
COOH
—
L’électrophorèse à pH 7 séparera nettement ces deux fragments puisque
le pentapeptide (@ ) (contenant du GLU) sera chargé négativement alors
que le tétrapeptide ( @) (contenant de l’ARG) le sera positivement :
©
9
V
ligne de dépôt
On aura donc après révélation par la ninhydrine deux taches franchement
séparées (une vers la cathode, une vers l’anode).
Par contre si c’est la séquence n° @ qui est exacte, l’hydrolyse enzymatique nous donnera également deux fragments mais qui seront :
—
un dipeptide de séquence :
/CYS—PHE\
:
@
H2N
COOH
-—
et un heptapeptide de séquence :
,ILE—GLU—THR—CYS—PRO—ARG—GLY\
:
@
H2N
COOH
L’électrophorèse, dans ce cas, ne séparera pas ces deux fragments car
l’heptapeptide ( @ ) possède à la fois GLU et ARG dont les charges
opposées qu’ils portent à pH 7 se neutraüseront plus ou moins ; quant au
dipeptide ( @ ) il est constitué de deux acides a—aminés dont les pHi sont de
l’ordre de 6 et qui
plus ou moins négativement à pH 7. D’où
l’électrophorégramme suivant :
@
+ï
@
ligne de dépôt
_
: