CYTOPLASME ET ORGANITES CYTOPLASMIQUES
Les méthodes de localisation d’activités enzymatiques permettent de mettre en
évidence au niveau du réticulum diverses phosphatases : nucléosides diphosphatases, glucose-6-phosphatase (fig. 42), phosphatase acide entre autres. De telles
réactions ne sont pas suffisamment nettes pour localiser électivement ces activités
au niveau des membranes ou dans les cavités, le produit de la réaction (phosphate
de plomb) occupant tout l’emplacement du réticulum (Novikoff, 1962, 1963).
Ces résultats peuvent être complétés par l’analyse de fractions.
UJ. ISOLEMENT DE FRACTIONS «RETICULUM ENDOPLASMIQUE»
Comme nous l’avons vu plus haut, les membranes du réticulum endoplasmique
portent souvent des ribosomes fortement attachés, et il est très rare que des cellules
ne contiennent que du réticulum agranulaire. En broyant les cellules, on obtient
une fraction « réticulum » formée de vésicules portant à leur surface externe
des ribosomes (fig. 43 a et b). Cette fraction, appelée fraction « microsomes »
(voir plus haut, p. 73) peut être débarrassée de ses ribosomes, sans que les membranes soient détruites, par action ménagée du désoxycholate de sodium. Après ce
traitement des microsomes, une centrifugation à 20 000 g permet d’obtenir une
fraction formée de vésicules du réticulum dont se sont détachés les ribosomes
FIOIMI 44
Concentration de protéines extracellulaires dans le réticulum endoplasmique. Dans les ovocytes du
grillon, les protéines du mileu extracellulaire sont captées par pinocytose, puis transportées dans les
cavités du réticulum endoplasmique; elles s’accumulent alors en des carrefours du réticulum, donnant
des grains de vitellus.
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Les méthodes de localisation d’activités enzymatiques permettent de mettre en
évidence au niveau du réticulum diverses phosphatases : nucléosides diphosphatases, glucose-6-phosphatase (fig. 42), phosphatase acide entre autres. De telles
réactions ne sont pas suffisamment nettes pour localiser électivement ces activités
au niveau des membranes ou dans les cavités, le produit de la réaction (phosphate
de plomb) occupant tout l’emplacement du réticulum (Novikoff, 1962, 1963).
Ces résultats peuvent être complétés par l’analyse de fractions.
UJ. ISOLEMENT DE FRACTIONS «RETICULUM ENDOPLASMIQUE»
Comme nous l’avons vu plus haut, les membranes du réticulum endoplasmique
portent souvent des ribosomes fortement attachés, et il est très rare que des cellules
ne contiennent que du réticulum agranulaire. En broyant les cellules, on obtient
une fraction « réticulum » formée de vésicules portant à leur surface externe
des ribosomes (fig. 43 a et b). Cette fraction, appelée fraction « microsomes »
(voir plus haut, p. 73) peut être débarrassée de ses ribosomes, sans que les membranes soient détruites, par action ménagée du désoxycholate de sodium. Après ce
traitement des microsomes, une centrifugation à 20 000 g permet d’obtenir une
fraction formée de vésicules du réticulum dont se sont détachés les ribosomes
FIOIMI 44
Concentration de protéines extracellulaires dans le réticulum endoplasmique. Dans les ovocytes du
grillon, les protéines du mileu extracellulaire sont captées par pinocytose, puis transportées dans les
cavités du réticulum endoplasmique; elles s’accumulent alors en des carrefours du réticulum, donnant
des grains de vitellus.
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