CARACTÈRES GÉNÉRAUX
sentent la chromatine (fig. 102 a). Chez les protocaryotes, la chromatine est le
seul constituant nucléaire et elle baigne directement dans le hyaloplasme.
Après fixation, l’observation au microscope à lumière permet de retrouver les
mêmes constituants nucléaires. La chromatine est plus visible; en outre elle
montre une grande affinité pour les colorants basiques et apparaît alors sous
forme de filaments reliant entre elles des masses plus denses ou chromocentres.
L’observation au microscope électronique du noyau de cellules fixées est assez
décevante; elle ne révèle en effet guère plus de détails que le microscope à lumière.
Cependant, le microscope électronique montre que chromatine et nucléole baignent
directement dans le nucléoplasme; ils ne sont pas limités par une membrane,
comme le sont certains des organites cytoplasmiques (fig. 102 b).
Constitution chimique 1.2.
1.2.1. ETUDE IN SITU
Les réactions cytochimiques montrent que les nucléoles sont riches en ARN
(test de Brachet), et que la chromatine est riche en ADN (réaction de Feulgen).
On peut également mettre en évidence des protéines acides et basiques au niveau
des divers constituants nucléaires.
Il est possible de doser la quantité d'ADN contenue dans le noyau par des méthodes
spectrophotométriques. La digestion enzymatique par la DNase, ou la RNase,
permet de déterminer les régions riches en ADN, ou en ARN, et cela même à
l’échelle des ultrastructures.
1.2.2. ISOLEMENT DE FRACTIONS «NOYAUX»
En broyant des cellules dans un milieu contenant du saccharose et des ions Ca-+, et en
opérant des centrifugations différentielles, on peut obtenir une fraction de noyaux interphasiques possédant encore leur membrane nucléaire intacte.
Les ribosomes attachés sur la face hyaloplasmique de cette membrane peuvent être enlevés
en faisant agir des tensio-actifs. Il est ainsi possible de réaliser des fractions pures de noyaux
sur lesquelles peuvent être pratiquées des analyses chimiques (fig. 103).
1.2.3. ANALYSE CHIMIQUE
L’analyse des noyaux isolés montre qu’ils renferment les principaux constituants
suivants :
— désoxyribonucléoprotéines
— ribonucléoprotéines
— enzymes
— ARN solubles
— nucléotides (ceux de l’ARN et de l'ADN et beaucoup d’ATP)
— acides aminés
— lipides
— sels de Mg++, Ca++, Fe++, Co++, Zn++
— eau
La concentration relative pour chacun de ces constituants varie selon le type
cellulaire auquel appartiennent les noyaux. Par exemple, les noyaux de spermato169
sentent la chromatine (fig. 102 a). Chez les protocaryotes, la chromatine est le
seul constituant nucléaire et elle baigne directement dans le hyaloplasme.
Après fixation, l’observation au microscope à lumière permet de retrouver les
mêmes constituants nucléaires. La chromatine est plus visible; en outre elle
montre une grande affinité pour les colorants basiques et apparaît alors sous
forme de filaments reliant entre elles des masses plus denses ou chromocentres.
L’observation au microscope électronique du noyau de cellules fixées est assez
décevante; elle ne révèle en effet guère plus de détails que le microscope à lumière.
Cependant, le microscope électronique montre que chromatine et nucléole baignent
directement dans le nucléoplasme; ils ne sont pas limités par une membrane,
comme le sont certains des organites cytoplasmiques (fig. 102 b).
Constitution chimique 1.2.
1.2.1. ETUDE IN SITU
Les réactions cytochimiques montrent que les nucléoles sont riches en ARN
(test de Brachet), et que la chromatine est riche en ADN (réaction de Feulgen).
On peut également mettre en évidence des protéines acides et basiques au niveau
des divers constituants nucléaires.
Il est possible de doser la quantité d'ADN contenue dans le noyau par des méthodes
spectrophotométriques. La digestion enzymatique par la DNase, ou la RNase,
permet de déterminer les régions riches en ADN, ou en ARN, et cela même à
l’échelle des ultrastructures.
1.2.2. ISOLEMENT DE FRACTIONS «NOYAUX»
En broyant des cellules dans un milieu contenant du saccharose et des ions Ca-+, et en
opérant des centrifugations différentielles, on peut obtenir une fraction de noyaux interphasiques possédant encore leur membrane nucléaire intacte.
Les ribosomes attachés sur la face hyaloplasmique de cette membrane peuvent être enlevés
en faisant agir des tensio-actifs. Il est ainsi possible de réaliser des fractions pures de noyaux
sur lesquelles peuvent être pratiquées des analyses chimiques (fig. 103).
1.2.3. ANALYSE CHIMIQUE
L’analyse des noyaux isolés montre qu’ils renferment les principaux constituants
suivants :
— désoxyribonucléoprotéines
— ribonucléoprotéines
— enzymes
— ARN solubles
— nucléotides (ceux de l’ARN et de l'ADN et beaucoup d’ATP)
— acides aminés
— lipides
— sels de Mg++, Ca++, Fe++, Co++, Zn++
— eau
La concentration relative pour chacun de ces constituants varie selon le type
cellulaire auquel appartiennent les noyaux. Par exemple, les noyaux de spermato169