POLLUANTS ORGANIQUES
1. PRINCIPES DE LA MÉTHODE
La méthode comporte une extraction liquide-liquide suivie de deux
chromatographies sur colonnes de Florisil et de Silicagel, successivement.
A ce stade, deux fractions sont obtenues : une fraction aliphatique saturée,
dénommée ALI, et une fraction aromatique, dénommée ARO.
La fraction aliphatique ALI est analysée directement par chromatographie
en phase gazeuse (CPG) haute résolution sur colonne capillaire couplée à
un détecteur à ionisation de flamme. La quantification est réalisée après intégration des pics chromatographiques et de l’enveloppe chromatographique
dite UCM (Unresolved Complex Mixture) par la méthode de l’étalon interne.
La caractérisation des hydrocarbures marqueurs de pollution de la fraction
ALI (fig. XXXI. 1) consiste à mettre en évidence par une programmation de
température optimisée les doublets des nor-pristane, pristane et phytane, de
triterpanes pentacycliques de la série du hopane (Albrecht et Dastillung,
1976). Les résultats peuvent être exprimés soit en hydrocarbures totaux
représentés par la somme des pics individualisés et de l’UCM (mg.kg-1),
soit en rapport d’indice de préférence (pair/impair), soit en rapport entre
les hydrocarbures et les isoprénoïdes (C17/pristane, C18/phytane).
La fraction aromatique ARO (fig. XXXI.2) peut être caractérisée et
quantifiée par chromatographie liquide haute performance (CLHP) couplée
avec deux types de détecteurs en ligne : un détecteur UV à 254 nm et un détecteur de fluorescence dont les longueurs d’onde d’excitation et d’émission
sont fixées respectivement à 360 et 418-700 nm ou 254 et 370-700 nm. La
séparation est réalisée sur silice greffée du type aminosilane qui a l’avantage
de séparer les H PA selon le nombre de cycles aromatiques condensés indépendamment du nombre de substituants alkyles. La quantification est réalisée par la méthode de l’étalon interne, ici le chrysène, après avoir déterminé
les facteurs de réponse moyens de certains HPA tests. L’estimation du taux
de HPA ne peut être que semi-quantitative du fait de la diversité de leurs
facteurs de réponse notamment en fluorimétrie.
Parallèlement à cette estimation des HPA, une purification par CLHP
est effectuée pour éliminer les nombreux composés biogéniques insaturés
présents dans la fraction aromatique provenant de la chromatographie sur
Silicagel. Ces composés (alcènes et cycloalcènes) sont élués en CLHP sur
support aminosilane dans la fraction de tête contenant les aromatiques à
un cycle et peuvent donc être éliminés facilement. La fraction aromatique
stricte est soumise à la CPG sur colonne de verre dans les mêmes conditions
analytiques que pour la fraction aliphatique. La quantification est réalisée
par la méthode de l’étalon interne.
La caractérisation des HPA soufrés marqueurs de pollution du type
dibenzothiophène (DBT) et dérivés alkylés est effectuée par CPG haute
performance couplée à un détecteur à photométrie de flamme en mode soufre
(Berthou et al., 1981).
Comme le résume le protocole d’analyse représenté sur la figure XXXI. 3,
les résultats peuvent être exprimés selon des modes différents et complémentaires. soit quantitatifs, soit qualitatifs.
348
1. PRINCIPES DE LA MÉTHODE
La méthode comporte une extraction liquide-liquide suivie de deux
chromatographies sur colonnes de Florisil et de Silicagel, successivement.
A ce stade, deux fractions sont obtenues : une fraction aliphatique saturée,
dénommée ALI, et une fraction aromatique, dénommée ARO.
La fraction aliphatique ALI est analysée directement par chromatographie
en phase gazeuse (CPG) haute résolution sur colonne capillaire couplée à
un détecteur à ionisation de flamme. La quantification est réalisée après intégration des pics chromatographiques et de l’enveloppe chromatographique
dite UCM (Unresolved Complex Mixture) par la méthode de l’étalon interne.
La caractérisation des hydrocarbures marqueurs de pollution de la fraction
ALI (fig. XXXI. 1) consiste à mettre en évidence par une programmation de
température optimisée les doublets des nor-pristane, pristane et phytane, de
triterpanes pentacycliques de la série du hopane (Albrecht et Dastillung,
1976). Les résultats peuvent être exprimés soit en hydrocarbures totaux
représentés par la somme des pics individualisés et de l’UCM (mg.kg-1),
soit en rapport d’indice de préférence (pair/impair), soit en rapport entre
les hydrocarbures et les isoprénoïdes (C17/pristane, C18/phytane).
La fraction aromatique ARO (fig. XXXI.2) peut être caractérisée et
quantifiée par chromatographie liquide haute performance (CLHP) couplée
avec deux types de détecteurs en ligne : un détecteur UV à 254 nm et un détecteur de fluorescence dont les longueurs d’onde d’excitation et d’émission
sont fixées respectivement à 360 et 418-700 nm ou 254 et 370-700 nm. La
séparation est réalisée sur silice greffée du type aminosilane qui a l’avantage
de séparer les H PA selon le nombre de cycles aromatiques condensés indépendamment du nombre de substituants alkyles. La quantification est réalisée par la méthode de l’étalon interne, ici le chrysène, après avoir déterminé
les facteurs de réponse moyens de certains HPA tests. L’estimation du taux
de HPA ne peut être que semi-quantitative du fait de la diversité de leurs
facteurs de réponse notamment en fluorimétrie.
Parallèlement à cette estimation des HPA, une purification par CLHP
est effectuée pour éliminer les nombreux composés biogéniques insaturés
présents dans la fraction aromatique provenant de la chromatographie sur
Silicagel. Ces composés (alcènes et cycloalcènes) sont élués en CLHP sur
support aminosilane dans la fraction de tête contenant les aromatiques à
un cycle et peuvent donc être éliminés facilement. La fraction aromatique
stricte est soumise à la CPG sur colonne de verre dans les mêmes conditions
analytiques que pour la fraction aliphatique. La quantification est réalisée
par la méthode de l’étalon interne.
La caractérisation des HPA soufrés marqueurs de pollution du type
dibenzothiophène (DBT) et dérivés alkylés est effectuée par CPG haute
performance couplée à un détecteur à photométrie de flamme en mode soufre
(Berthou et al., 1981).
Comme le résume le protocole d’analyse représenté sur la figure XXXI. 3,
les résultats peuvent être exprimés selon des modes différents et complémentaires. soit quantitatifs, soit qualitatifs.
348