HYDROCARBURES-SFUV (EAU, ORGANISMES)
— pour les organismes, 100 ml d’éluat sont recueillis.
Ces extraits sont prêts pour l’analyse par fluorescence.
7.3. MESURE
La mesure se fait par spectrofluorimétrie UV, en plaçant une fraction
de l’extrait purifié dans une cuve en quartz de 1 cm de trajet optique. La
longueur d’onde d’excitation est fixée à 310 nm. L’émission de fluorescence
est mesurée entre 500 et 310 nm. La fluorescence maximale se situe habituellement à 360 nm pour les hydrocarbures (essentiellement les dérivés substitués
du benzène et les composés aromatiques polynucléaires). L’émission maximale de fluorescence peut être déterminée sur un enregistrement graphique.
Il sera nécessaire dans certains cas de diluer l’extrait pour être dans la gamme
de réponse linéaire de l’appareil, déterminée par la courbe d’étalonnage.
7.4. ÉTALONNAGE
Dans le cas d’une pollution pétrolière identifiée, on peut préparer plusieurs dilutions de concentrations connues du pétrole brut dans de l’hexane.
La courbe d’étalonnage est tracée en fonction des diverses concentrations et
permet de déterminer la gamme linéaire de l’appareil. A titre d’exemple,
cette gamme se situait entre 0 et 4 pg par millilitre d’hexane pour le pétrole de
I’amoco cadiz.
Toutefois pour effectuer l’étalonnage d’appareils entre laboratoires,
I’unesco préconise le chrysène comme hydrocarbure de comparaison.
Si un pétrole brut est pris comme norme d’étalonnage, il est possible
de calculer le rapport entre les propriétés de fluorescence de ce produit et
celles du chrysène. Le coefficient de comparaison R se calcule de la manière
suivante :
le
R =
x
Pc
avec :
. Ic : intensité de fluorescence de l’échantillon de chrysène,
. IP : intensité de fluorescence de l’échantillon de pétrole,
. Pc : poids de chrysène contenu dans l’échantillon,
. Pp : poids de pétrole contenu dans l’échantillon.
7.5. BLANC
Le blanc analytique provient des réactifs utilisés, en particulier des solvants. Pour le déterminer, on prend un volume de solvant d extraction égal
à celui que l’on utilise pour extraire un échantillon et on lui fait subir exactement le même traitement que l’extrait (purification, concentration, ...).
Un blanc est effectué avec chaque série d’échantillons analysés simultanément, et pour chaque lot de solvants.
La fluorescence obtenue pour le blanc est soustraite de celle de chaque
échantillon.
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— pour les organismes, 100 ml d’éluat sont recueillis.
Ces extraits sont prêts pour l’analyse par fluorescence.
7.3. MESURE
La mesure se fait par spectrofluorimétrie UV, en plaçant une fraction
de l’extrait purifié dans une cuve en quartz de 1 cm de trajet optique. La
longueur d’onde d’excitation est fixée à 310 nm. L’émission de fluorescence
est mesurée entre 500 et 310 nm. La fluorescence maximale se situe habituellement à 360 nm pour les hydrocarbures (essentiellement les dérivés substitués
du benzène et les composés aromatiques polynucléaires). L’émission maximale de fluorescence peut être déterminée sur un enregistrement graphique.
Il sera nécessaire dans certains cas de diluer l’extrait pour être dans la gamme
de réponse linéaire de l’appareil, déterminée par la courbe d’étalonnage.
7.4. ÉTALONNAGE
Dans le cas d’une pollution pétrolière identifiée, on peut préparer plusieurs dilutions de concentrations connues du pétrole brut dans de l’hexane.
La courbe d’étalonnage est tracée en fonction des diverses concentrations et
permet de déterminer la gamme linéaire de l’appareil. A titre d’exemple,
cette gamme se situait entre 0 et 4 pg par millilitre d’hexane pour le pétrole de
I’amoco cadiz.
Toutefois pour effectuer l’étalonnage d’appareils entre laboratoires,
I’unesco préconise le chrysène comme hydrocarbure de comparaison.
Si un pétrole brut est pris comme norme d’étalonnage, il est possible
de calculer le rapport entre les propriétés de fluorescence de ce produit et
celles du chrysène. Le coefficient de comparaison R se calcule de la manière
suivante :
le
R =
x
Pc
avec :
. Ic : intensité de fluorescence de l’échantillon de chrysène,
. IP : intensité de fluorescence de l’échantillon de pétrole,
. Pc : poids de chrysène contenu dans l’échantillon,
. Pp : poids de pétrole contenu dans l’échantillon.
7.5. BLANC
Le blanc analytique provient des réactifs utilisés, en particulier des solvants. Pour le déterminer, on prend un volume de solvant d extraction égal
à celui que l’on utilise pour extraire un échantillon et on lui fait subir exactement le même traitement que l’extrait (purification, concentration, ...).
Un blanc est effectué avec chaque série d’échantillons analysés simultanément, et pour chaque lot de solvants.
La fluorescence obtenue pour le blanc est soustraite de celle de chaque
échantillon.
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