Microbiologie pratique pour le laboratoire d analyses ou de contrôle sanitaire
- la nonne NF EN ISO 6887-4/AC 1 (2004) pour les produits autres que les
produits laitiers, les produits camés et les produits de la pêche.
Deux types d’appareils permettent d’effectuer la préparation des échantillons
d’aliments en microbiologie :
- des appareils broient des aliments solides, déposés avec le diluant dans des
sacs stériles irradiés, dans une chambre fermée, grâce à un système de pales de
broyage en inox ; le temps de broyage est réglable (de 10 secondes à 3 minutes,
par exemple) ;
- d'autres appareils appelés « broyeurs à couteaux » broient des aliments solides (viandes, végétaux, substances sèches ou fibreuses), déposés avec le diluant
dans un bol de broyage en verre (de capacité variable et autoclavable) muni de
couteaux. Le bol avec son couvercle de sécurité est déposé sur l'appareil, les couteaux vont broyer l’aliment à une vitesse pouvant aller jusqu’à 14 000 tours/min
pendant le temps choisi.
3.2.
Diluteurs d'échantillons
La société AES Laboratoire propose une gamme d’appareils Dilumat® qui assurent la réalisation des trois étapes de la préparation des échantillons : pesée, dilution
et enregistrement des paramètres, avec une traçabilité optimum. Des diluants déshydratés en quantité suffisante pour (QSP) ou prêts à l’emploi sont disponibles (eau
peptonée tamponnée, tryptone sel, Fraser 1/2 pour la recherche des Listeria).
3.3.
Appareils à filtration
La hitration consiste à faire passer des produits liquides sur une paroi poreuse
ou sur une membrane qui retient les bactéries ; le filtrat recueilli est exempt de
microbes. Cette technique est utile :
pour stériliser des milieux de culture ou des solutions qui ne peuvent pas être
stérilisées à I autoclave, car elles contiennent des substances thermolabiles (des
membranes filtrantes ayant un diamètre de pore de 0,22 pm sont employées) ;
pour recueillir les bactéries contenues dans des échantillons d’eaux à analyser par la technique de filtration sur membranes (c/. première partie, chapitre 4
« Méthodes de travail en microbiologie », paragraphe 3.2.2.4).
Pour cette dernière application, les laboratoires d’hygiène disposent en général
de rampes de filtration sous vide de trois à cinq postes en PVC (non autoclavable) ou en acier inox (autoclavable) ; sur celles-ci s’adaptent soit des entonnoirs
de filtration en inox ou en verre borosilicaté stérilisables, à équiper en membranes stér des de 0.45 pm ou 0.22 pm selon les besoins, soit des unités de filtration
déjà pourvues de membranes (vendues stériles en sachet unitaire) ;
I our les salles de travaux pratiques, il est préférable de faire appel à des appareils de filtration unitaires tels que l’appareil « Unité aseptique Stérifil. support
4 mm » commercialisé depuis plus de 20 ans par Millipore (2005). Une fois stérilise 3 minutes dans de l’eau bouillante avant usage, il peut être équipé de menirancs stériles comme les appareils ci-dessus ; il devra à nouveau être stérilisé
apres usage.
- la nonne NF EN ISO 6887-4/AC 1 (2004) pour les produits autres que les
produits laitiers, les produits camés et les produits de la pêche.
Deux types d’appareils permettent d’effectuer la préparation des échantillons
d’aliments en microbiologie :
- des appareils broient des aliments solides, déposés avec le diluant dans des
sacs stériles irradiés, dans une chambre fermée, grâce à un système de pales de
broyage en inox ; le temps de broyage est réglable (de 10 secondes à 3 minutes,
par exemple) ;
- d'autres appareils appelés « broyeurs à couteaux » broient des aliments solides (viandes, végétaux, substances sèches ou fibreuses), déposés avec le diluant
dans un bol de broyage en verre (de capacité variable et autoclavable) muni de
couteaux. Le bol avec son couvercle de sécurité est déposé sur l'appareil, les couteaux vont broyer l’aliment à une vitesse pouvant aller jusqu’à 14 000 tours/min
pendant le temps choisi.
3.2.
Diluteurs d'échantillons
La société AES Laboratoire propose une gamme d’appareils Dilumat® qui assurent la réalisation des trois étapes de la préparation des échantillons : pesée, dilution
et enregistrement des paramètres, avec une traçabilité optimum. Des diluants déshydratés en quantité suffisante pour (QSP) ou prêts à l’emploi sont disponibles (eau
peptonée tamponnée, tryptone sel, Fraser 1/2 pour la recherche des Listeria).
3.3.
Appareils à filtration
La hitration consiste à faire passer des produits liquides sur une paroi poreuse
ou sur une membrane qui retient les bactéries ; le filtrat recueilli est exempt de
microbes. Cette technique est utile :
pour stériliser des milieux de culture ou des solutions qui ne peuvent pas être
stérilisées à I autoclave, car elles contiennent des substances thermolabiles (des
membranes filtrantes ayant un diamètre de pore de 0,22 pm sont employées) ;
pour recueillir les bactéries contenues dans des échantillons d’eaux à analyser par la technique de filtration sur membranes (c/. première partie, chapitre 4
« Méthodes de travail en microbiologie », paragraphe 3.2.2.4).
Pour cette dernière application, les laboratoires d’hygiène disposent en général
de rampes de filtration sous vide de trois à cinq postes en PVC (non autoclavable) ou en acier inox (autoclavable) ; sur celles-ci s’adaptent soit des entonnoirs
de filtration en inox ou en verre borosilicaté stérilisables, à équiper en membranes stér des de 0.45 pm ou 0.22 pm selon les besoins, soit des unités de filtration
déjà pourvues de membranes (vendues stériles en sachet unitaire) ;
I our les salles de travaux pratiques, il est préférable de faire appel à des appareils de filtration unitaires tels que l’appareil « Unité aseptique Stérifil. support
4 mm » commercialisé depuis plus de 20 ans par Millipore (2005). Une fois stérilise 3 minutes dans de l’eau bouillante avant usage, il peut être équipé de menirancs stériles comme les appareils ci-dessus ; il devra à nouveau être stérilisé
apres usage.