Streptococcus et Enterococcus
405
6.2.3. Préparation, inoculation et incubation de la galerie
• Vérifier l’appartenance de la souche à étudier à la famille des Streptococcaceae ou des Enterococcaceae (cocci Gram+, catalase-) (cf tableaux 131 et
132).
Noter également le type d’hémolyse et la production de pigments, utilisés
comme tests complémentaires.
• Prélever une colonie bien isolée et réaliser une subculture sur une gélose
Columbia au sang de mouton avec ou sans ANC (cf. supra, paragraphe 5.1.1.).
Incuber 18 à 24 heures à 37 °C en aérobiose ou en anaérobiose.
► Remarque
Les colonies de streptocoques P-hémolytiques et d’entérocoques ont une taille
suffisante après 24 heures d’incubation. Pour les autres streptocoques, il est préférable d’utiliser des colonies incubées pendant 48 heures en anaérobiose.
• Prendre une ampoule d’API® Medium de 2 mL (ou de 3 mL en cas
d’utilisation de l’inoculateur ATB®) ou utiliser un tube contenant de l’eau
distillée stérile sans additif. Puis réaliser une suspension en prélevant la culture à
l’aide d’un écouvillon stérile.
La suspension doit être ajustée à la diode n° 30 du Densitomètre AI B® ou 4
de Mac Farland sur le Densimat. L’utilisation de ces instruments est impérative
en cas de lecture automatique de la galerie.
• Inoculer la galerie automatiquement avec 1 inoculateur ATB\ suivant les
indications du fabricant, ou manuellement. Dans ce cas, homogénéiser I ampoule
d’API® Suspension medium préparée et inoculer la galerie en distribuant
exactement 55 pL de suspension par cupule avec la pipette électronique ATB51.
Mettre le couvercle sur la galerie.
Incuber à 36 ± 2 °C pendant 4 à 4 h 30 en aérobiose.
6.2.4. Lecture de la galerie
Des extraits du tableau de lecture de la galerie rapid ID 32 STREP sont présentés dans le tableau 135A pour les tests ADH à CDEX (première rangée de
cupules) et dans le tableau 135B pour les tests VP à URE (deuxième rangée de
cupules).
Pour la lecture, révéler tout d'abord les réactions de la seconde rangée : test
VP et tests APPA à GTA. Faire ensuite une lecture automatique avec les tnstruvicnplle • dans ce cas, noter les résultats sur la
ments précités ou une lecture visuelle . u
405
6.2.3. Préparation, inoculation et incubation de la galerie
• Vérifier l’appartenance de la souche à étudier à la famille des Streptococcaceae ou des Enterococcaceae (cocci Gram+, catalase-) (cf tableaux 131 et
132).
Noter également le type d’hémolyse et la production de pigments, utilisés
comme tests complémentaires.
• Prélever une colonie bien isolée et réaliser une subculture sur une gélose
Columbia au sang de mouton avec ou sans ANC (cf. supra, paragraphe 5.1.1.).
Incuber 18 à 24 heures à 37 °C en aérobiose ou en anaérobiose.
► Remarque
Les colonies de streptocoques P-hémolytiques et d’entérocoques ont une taille
suffisante après 24 heures d’incubation. Pour les autres streptocoques, il est préférable d’utiliser des colonies incubées pendant 48 heures en anaérobiose.
• Prendre une ampoule d’API® Medium de 2 mL (ou de 3 mL en cas
d’utilisation de l’inoculateur ATB®) ou utiliser un tube contenant de l’eau
distillée stérile sans additif. Puis réaliser une suspension en prélevant la culture à
l’aide d’un écouvillon stérile.
La suspension doit être ajustée à la diode n° 30 du Densitomètre AI B® ou 4
de Mac Farland sur le Densimat. L’utilisation de ces instruments est impérative
en cas de lecture automatique de la galerie.
• Inoculer la galerie automatiquement avec 1 inoculateur ATB\ suivant les
indications du fabricant, ou manuellement. Dans ce cas, homogénéiser I ampoule
d’API® Suspension medium préparée et inoculer la galerie en distribuant
exactement 55 pL de suspension par cupule avec la pipette électronique ATB51.
Mettre le couvercle sur la galerie.
Incuber à 36 ± 2 °C pendant 4 à 4 h 30 en aérobiose.
6.2.4. Lecture de la galerie
Des extraits du tableau de lecture de la galerie rapid ID 32 STREP sont présentés dans le tableau 135A pour les tests ADH à CDEX (première rangée de
cupules) et dans le tableau 135B pour les tests VP à URE (deuxième rangée de
cupules).
Pour la lecture, révéler tout d'abord les réactions de la seconde rangée : test
VP et tests APPA à GTA. Faire ensuite une lecture automatique avec les tnstruvicnplle • dans ce cas, noter les résultats sur la
ments précités ou une lecture visuelle . u