Staphylococcus, Micrococcus et ex-Micrococcus
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63.1.1. Composition de la galerie
La galerie API Staph est composée de 20 microtubes (surmontés de cupules)
contenant des substrats déshydratés, qui permettent de réaliser 19 tests biochimiques appartenant au métabolisme respiratoire, glucidique et protéique des bactéries (cf. infra, tableau 123).
La galerie est inoculée avec API Staph Medium, milieu de culture dont la
composition chimique qsp 1 000 mL d’eau minéralisée est la suivante :
Extrait de levure....................................................................................
0,5
Bactopeptone (origine bovine/porcine).................................................. 10
NaCl........................................................................................................
5
Oligo-éléments........................................................................................ 10 mL
pH 7,0-7,2 à 25 °C
Ce milieu est disponible en ampoules de 7 mL.
63.1.2. Préparation, inoculation et incubation de la galerie
•À partir d’une culture pure (de 18 à 24 heures) de staphylocoque, microcoque ou ex-microcoque sur gélose Columbia au sang (ou Agar P), préparer une
suspension bactérienne homogène, d’opacité égale à 0,5 de Mac Farland dans
une ampoule de milieu API Staph Medium, par comparaison à un témoin
d’opacité du Mc Farland Standard.
Ensemencer la galerie en respectant le mode opératoire du fabricant.
Incuber à 36 ± 2 °C pendant 18 à 24 heures.
• Réaliser le test à la lysostaphine qui constitue le 21e test de cette galerie
d identification (cf. supra, paragraphe 6.2.2.3.).
63.1.3. Lecture de la galerie
Après incubation, lire les réactions en appliquant le tableau de lecture, dont un
extrait est donné dans le tableau 123 en notant que .
- les tests d’acidification doivent être lus comparativement aux témoins négatif (0) et positif (GLU) ;
- les tests MNE et XLT peuvent être orange, lorsqu’ils sont entourés ou précédés de tests positifs. On doit alors les considérer comme négatifs.
Tableau 123 ■ Extrait du tableau de lecture de la galerie api Staph.
Test
Composants actifs
( réact ions/enzy mes )
Résultat
Négatif
Positif
0
Aucun (témoin négatit)
Rouge
—
GLU
D-glucose (témoin positif)
Rouge
Jaune
FRU
D-fructose’
MNE
D-mannose
j
mal
P-maltose'
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63.1.1. Composition de la galerie
La galerie API Staph est composée de 20 microtubes (surmontés de cupules)
contenant des substrats déshydratés, qui permettent de réaliser 19 tests biochimiques appartenant au métabolisme respiratoire, glucidique et protéique des bactéries (cf. infra, tableau 123).
La galerie est inoculée avec API Staph Medium, milieu de culture dont la
composition chimique qsp 1 000 mL d’eau minéralisée est la suivante :
Extrait de levure....................................................................................
0,5
Bactopeptone (origine bovine/porcine).................................................. 10
NaCl........................................................................................................
5
Oligo-éléments........................................................................................ 10 mL
pH 7,0-7,2 à 25 °C
Ce milieu est disponible en ampoules de 7 mL.
63.1.2. Préparation, inoculation et incubation de la galerie
•À partir d’une culture pure (de 18 à 24 heures) de staphylocoque, microcoque ou ex-microcoque sur gélose Columbia au sang (ou Agar P), préparer une
suspension bactérienne homogène, d’opacité égale à 0,5 de Mac Farland dans
une ampoule de milieu API Staph Medium, par comparaison à un témoin
d’opacité du Mc Farland Standard.
Ensemencer la galerie en respectant le mode opératoire du fabricant.
Incuber à 36 ± 2 °C pendant 18 à 24 heures.
• Réaliser le test à la lysostaphine qui constitue le 21e test de cette galerie
d identification (cf. supra, paragraphe 6.2.2.3.).
63.1.3. Lecture de la galerie
Après incubation, lire les réactions en appliquant le tableau de lecture, dont un
extrait est donné dans le tableau 123 en notant que .
- les tests d’acidification doivent être lus comparativement aux témoins négatif (0) et positif (GLU) ;
- les tests MNE et XLT peuvent être orange, lorsqu’ils sont entourés ou précédés de tests positifs. On doit alors les considérer comme négatifs.
Tableau 123 ■ Extrait du tableau de lecture de la galerie api Staph.
Test
Composants actifs
( réact ions/enzy mes )
Résultat
Négatif
Positif
0
Aucun (témoin négatit)
Rouge
—
GLU
D-glucose (témoin positif)
Rouge
Jaune
FRU
D-fructose’
MNE
D-mannose
j
mal
P-maltose'