Staphylococcus, Micrococcus et ex-Micrococcus
375
• Préparer une culture en bouillon trypcase soja de la souche à identifier
(c/. première partie, chapitre 3 « Préparation et stérilisation du matériel et des
milieux de culture », paragraphe 4.1.1.2.).
• Préparer également de la gélose de Mueller-Hinton 2 bioMérieux® SA à
partir du milieu déshydraté.
La formule théorique de ce milieu en g/L d’eau purifiée est :
Peptone de caséine (bovin)................................................................... 17,5
Extrait de viande (bovin ou porcin)....................................................
2
Fécule de pomme de terre.....................................................................
1,5
Agar........................................................................................................ 17
Ion Ca++................................................................................................. 50 mg/L
Ion Mg++............................................................................................... 25 mg/L
pH 7,3
Stérilisation à l’autoclave à 116 °C pendant 15 minutes
Ce milieu est également disponible en flacons et en boîtes de Pétri prêts à
l'emploi.
Ce milieu de culture est destiné à la réalisation d'antibiogrammes par diffusion, pour des bactéries non exigeantes, en bactériologie médicale (cf. annexe
générale 6 « Notions sur les antibiotiques »). Le préparer ici dans une boîte de
Pétri de 55 mm de diamètre s’il y a une seule souche à tester.
• Transférer 0,1 mL de la culture en bouillon trypcase soja dans 10 mL d'eau
peptonée tamponnée (cf. première partie, chapitre 4 « Méthodes de travail en
microbiologie », paragraphe 3.1.1.2.) et homogénéiser.
Ensemencer par inondation une boîte de milieu de Mueller-Hinton ; pour cela,
à l’aide d’une pipette stérile, laisser écouler 3 mL environ de la dilution en eau
peptonée à la surface de la gélose pour la recouvrir entièrement, puis enlever
l’inoculum apporté en inclinant la boîte et en l'aspirant. Laisser sécher la boîte
15 minutes à température ambiante.
Déposer aseptiquement au centre de la boîte un disque de nitrofurantoïne à
300 pg/mL.
Incuber 16 à 18 heures à 37 °C.
».
i
dp la zone d'inhibition autour du disque:
• Mesurer le diamètre de la zone u
.
, . .
» jnfpripnr à 15 mm, la souche est résistante à la
- lorsque celui-ci est m
nitrofurantoïne : les microcoque.
♦ cnnprieur à 5 mm. la souche est dite sensible : les
- lorsque le diamètre est supérieur a
staphylocoques sont sensibles.
îtanhvlococcaceae et des Micrococcaceae IDerCe test de différentiation ‘
biochimiques de différentiation. peut prétnacoccaceae, comme d autre.
senter des exceptions.
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• Préparer une culture en bouillon trypcase soja de la souche à identifier
(c/. première partie, chapitre 3 « Préparation et stérilisation du matériel et des
milieux de culture », paragraphe 4.1.1.2.).
• Préparer également de la gélose de Mueller-Hinton 2 bioMérieux® SA à
partir du milieu déshydraté.
La formule théorique de ce milieu en g/L d’eau purifiée est :
Peptone de caséine (bovin)................................................................... 17,5
Extrait de viande (bovin ou porcin)....................................................
2
Fécule de pomme de terre.....................................................................
1,5
Agar........................................................................................................ 17
Ion Ca++................................................................................................. 50 mg/L
Ion Mg++............................................................................................... 25 mg/L
pH 7,3
Stérilisation à l’autoclave à 116 °C pendant 15 minutes
Ce milieu est également disponible en flacons et en boîtes de Pétri prêts à
l'emploi.
Ce milieu de culture est destiné à la réalisation d'antibiogrammes par diffusion, pour des bactéries non exigeantes, en bactériologie médicale (cf. annexe
générale 6 « Notions sur les antibiotiques »). Le préparer ici dans une boîte de
Pétri de 55 mm de diamètre s’il y a une seule souche à tester.
• Transférer 0,1 mL de la culture en bouillon trypcase soja dans 10 mL d'eau
peptonée tamponnée (cf. première partie, chapitre 4 « Méthodes de travail en
microbiologie », paragraphe 3.1.1.2.) et homogénéiser.
Ensemencer par inondation une boîte de milieu de Mueller-Hinton ; pour cela,
à l’aide d’une pipette stérile, laisser écouler 3 mL environ de la dilution en eau
peptonée à la surface de la gélose pour la recouvrir entièrement, puis enlever
l’inoculum apporté en inclinant la boîte et en l'aspirant. Laisser sécher la boîte
15 minutes à température ambiante.
Déposer aseptiquement au centre de la boîte un disque de nitrofurantoïne à
300 pg/mL.
Incuber 16 à 18 heures à 37 °C.
».
i
dp la zone d'inhibition autour du disque:
• Mesurer le diamètre de la zone u
.
, . .
» jnfpripnr à 15 mm, la souche est résistante à la
- lorsque celui-ci est m
nitrofurantoïne : les microcoque.
♦ cnnprieur à 5 mm. la souche est dite sensible : les
- lorsque le diamètre est supérieur a
staphylocoques sont sensibles.
îtanhvlococcaceae et des Micrococcaceae IDerCe test de différentiation ‘
biochimiques de différentiation. peut prétnacoccaceae, comme d autre.
senter des exceptions.