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Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
► Mode d'action
Le mélange sélectif, à composition chimique non précisée inhibe la plupart des
bactéries (Gram+ et Gram- ) autres que les staphylocoques, ainsi que les levures.
Le mélange chromogène est composé de deux substrats :
- le premier assure l'identification directe de Staphylococcus aureus qui produit une a-glucosidase, enzyme qui hydrolyse ce substrat en libérant notamment
un composé chromogène vert ;
- le deuxième permet la différentiation d’autres espèces de staphylocoques
qui, par leur activité enzymatique, hydrolysent ce substrat en libérant un composé de couleur rose ou mauve.
5.25.2. Ensemencement et incubation du milieu
Ensemencer directement le prélèvement à analyser par la technique des stries
sur les boîtes de Petri.
Incuber sans délai, à l’étuve à 37 °C en aérobiose et à l’abri de la lumière pendant 18 à 24 heures.
5.25.5. Lecture et interprétation du milieu
Les colonies de S. aureus sont vertes. Cependant, les principales « limites du
test » mentionnées dans la fiche technique du milieu de culture sont les
suivantes :
- certaines souches de Staphylococcus coagulase+, autres que S. aureus, donnent également des colonies vertes ;
- certaines souches autres que S. aureus peuvent donner des colonies vertes
(par exemple : S. saprophy tiens, S. haemolyticus, S. warneri, Micrococcus) ;
- certaines espèces microbiennes peuvent donner des colonies de couleur verte qui
se différentient de S. aureus par l'aspect morphologique des colonies [petites colonies
fines par exemple : Enterococcus, Streptococcus, Stomatococcus et Candida (levure)] ;
- dans certains cas, il peut être nécessaire de prolonger l’incubation au-delà de
24 heures. Dans ces conditions, toute colonie verte doit être identifiée par des
tests complémentaires ;
- pour certaines souches de S. aureus, la couleur des colonies peut évoluer du
vert au gris violacé après 48 heures d’incubation.
Les colonies blanches, roses ou mauves correspondent à d'autres espèces de
staphylocoques : les colonies blanches sont des espèces de staphylocoques n utilisant aucun substrat du milieu de culture.
5.25.4. Contrôle de qualité du milieu
I bur le contrôle de fertilité du milieu, la souche Staphylococcus aureus ATCC
259_3 présenté une croissance, avec des colonies vertes sur ce milieu, après
24 heures d'incubation de 33 à 37 °C.
La souche Staphylococcus xylosus ATCC 29971 produit, dans les mêmes
conditions que la souche précédente, des colonies d une autre couleur.
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