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Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
Préparer des boîtes de Pétri à partir du milieu déshydraté suivant les indications
du fabricant ou utiliser des boîtes de Pétri prêtes à l’emploi. Laisser les boîtes revenir à température ambiante avant usage.
► Mode d'action
Le chlorure de sodium à concentration élevée (75 g/L) inhibe de nombreux
germes, sauf les germes halophiles ou halotolérants (cf. annexe générale 1
« Lexique de microbiologie »).
Certaines souches de staphylocoques pouvant être partiellement inhibées par
le chlorure de sodium, il est recommandé d’associer la gélose de Chapman avec
des milieux non inhibiteurs tels que la gélose Columbia au sang de mouton
(cf. chapitre 3 « Préparation et stérilisation des milieux de culture », paragraphe
4.1.2.2.).
La fermentation du mannitol (polyalcool) par certaines espèces de staphylocoques. libère des acides qui font virer le rouge de phénol au jaune en milieu acide ;
dans le cas contraire, le milieu conserve sa couleur rouge initiale.
5.2.3.2. Ensemencement et incubation du milieu
► En bactériologie médicale
Ensemencer en stries des boîtes de gélose de Chapman à partir du prélèvement
biologique.
Incuber à 37 °C pendant 24 à 48 heures.
► En bactériologie des eaux (Delarras et Trébaol, 2003)
Filtrer 100 mL d’eau de piscine (chlorée) sur une membrane de 0,45 pm de
diamètre de pores et déposer stérilement cette dernière à la surface d’une gélose
de C hapman (en boîte de Pétri de 55 mm de diamètre).
Incuber à 37 ± 1 °C pendant 48 heures.
► En bactériologie industrielle
Ensemencer I échantillon soumis à un enrichissement préalable (cf. supra,
paragraphe 5.1.) sur des boîtes de gélose de Chapman.
Incuber entre 33 et 37 C pendant 24 à 48 heures suivant les produits.
5.233. Lecture et interprétation du milieu
Les colonies jaunes entourées d’une zone jaune, mannitol+ sont des Staphylococcus aureus. S. saprophyticus...
Les colonies entourées d une zone rouge ou pourpre, mannitol— sont des
Staphylococcus epidermidis, S. hominis...
Dans tous les cas. observer les colonies présomptives des staphylocoques ।
recherchés (colonies jaunes avec S. aureus) et procéder à leur identification §
biochimique et/ou immunologique.
5
La photocopie non
autorisée est un délit
Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
Préparer des boîtes de Pétri à partir du milieu déshydraté suivant les indications
du fabricant ou utiliser des boîtes de Pétri prêtes à l’emploi. Laisser les boîtes revenir à température ambiante avant usage.
► Mode d'action
Le chlorure de sodium à concentration élevée (75 g/L) inhibe de nombreux
germes, sauf les germes halophiles ou halotolérants (cf. annexe générale 1
« Lexique de microbiologie »).
Certaines souches de staphylocoques pouvant être partiellement inhibées par
le chlorure de sodium, il est recommandé d’associer la gélose de Chapman avec
des milieux non inhibiteurs tels que la gélose Columbia au sang de mouton
(cf. chapitre 3 « Préparation et stérilisation des milieux de culture », paragraphe
4.1.2.2.).
La fermentation du mannitol (polyalcool) par certaines espèces de staphylocoques. libère des acides qui font virer le rouge de phénol au jaune en milieu acide ;
dans le cas contraire, le milieu conserve sa couleur rouge initiale.
5.2.3.2. Ensemencement et incubation du milieu
► En bactériologie médicale
Ensemencer en stries des boîtes de gélose de Chapman à partir du prélèvement
biologique.
Incuber à 37 °C pendant 24 à 48 heures.
► En bactériologie des eaux (Delarras et Trébaol, 2003)
Filtrer 100 mL d’eau de piscine (chlorée) sur une membrane de 0,45 pm de
diamètre de pores et déposer stérilement cette dernière à la surface d’une gélose
de C hapman (en boîte de Pétri de 55 mm de diamètre).
Incuber à 37 ± 1 °C pendant 48 heures.
► En bactériologie industrielle
Ensemencer I échantillon soumis à un enrichissement préalable (cf. supra,
paragraphe 5.1.) sur des boîtes de gélose de Chapman.
Incuber entre 33 et 37 C pendant 24 à 48 heures suivant les produits.
5.233. Lecture et interprétation du milieu
Les colonies jaunes entourées d’une zone jaune, mannitol+ sont des Staphylococcus aureus. S. saprophyticus...
Les colonies entourées d une zone rouge ou pourpre, mannitol— sont des
Staphylococcus epidermidis, S. hominis...
Dans tous les cas. observer les colonies présomptives des staphylocoques ।
recherchés (colonies jaunes avec S. aureus) et procéder à leur identification §
biochimique et/ou immunologique.
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La photocopie non
autorisée est un délit