Levures et moisissures
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Pour ces derniers, deux tests peuvent être pratiqués :
-le test de formation des chlamydospores sur la gélose PCB précitée ;
-un test de filamentation ou blastèse sur une gélose Blastèse.
5./3.1. Gélose PCB Bio-Rad
La gélose PCB est un milieu utilisé pour l’identification des levures du genre
Candida et en particulier de l’espèce Candida albicans.
► Composition chimique et mode d’action du milieu de culture
La composition chimique (formule type) de ce milieu de culture en g/L d’eau
distillée est :
Carottes épluchées et râpées.............................................................. 20
Pommes de terre épluchées et râpées.................................................. 20
Bile de bœuf............................................................................................150
Agar.......................................................................................................... 25
pH 6,8 ± 0,2 à 25 °C
Ce milieu est disponible en tubes de 8 mL prêts à l’emploi.
La bile de bœuf à forte concentration inhibe le développement des bactéries et
de certaines levures.
Les carottes et les pommes de terre apportent les substances nutritives favorisant la croissance des levures du genre Candida.
► Ensemencement et incubation du milieu
À partir d’une gélose Sabouraud (cf supra, paragraphe 3.2.) incubée à 37 C
pendant 24 à 48 heures, prélever une colonie présumée du genre Candida et a
repiquer en faisant quelques stries dans le fond du tube, puis une strie termina c
légèrement en profondeur.
Incuber à 27 ± 1 °C pendant 24 à 48 heures.
► Lecture et interprétation du milieu
Rechercher au microscope les chlamydospores de Candida albicans dans les
zones filamenteuses développées.
S il n’y en a pas, ensemencer un nouveau tube de gélose PCB et incuber à
C pendant 48 heures.
Si I observation est toujours négative, la détermination de 1 espèce de C andida
Peut être faite par les techniques de l’auxanogramme (assimilation de sucres) et/
Ou du zymogramme (fermentation de sucres), intervenant maintenant dans les
mærométhodes d’identification (cf. infra, paragraphe 5.2.).
«
k ( ontrôle de qualité du milieu
La souche Candida albicans ATCC 2091 se développe sur la gélose PCB avec
Ponction de chlamydospores, après 48 à 72 heures d incubation a température
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Pour ces derniers, deux tests peuvent être pratiqués :
-le test de formation des chlamydospores sur la gélose PCB précitée ;
-un test de filamentation ou blastèse sur une gélose Blastèse.
5./3.1. Gélose PCB Bio-Rad
La gélose PCB est un milieu utilisé pour l’identification des levures du genre
Candida et en particulier de l’espèce Candida albicans.
► Composition chimique et mode d’action du milieu de culture
La composition chimique (formule type) de ce milieu de culture en g/L d’eau
distillée est :
Carottes épluchées et râpées.............................................................. 20
Pommes de terre épluchées et râpées.................................................. 20
Bile de bœuf............................................................................................150
Agar.......................................................................................................... 25
pH 6,8 ± 0,2 à 25 °C
Ce milieu est disponible en tubes de 8 mL prêts à l’emploi.
La bile de bœuf à forte concentration inhibe le développement des bactéries et
de certaines levures.
Les carottes et les pommes de terre apportent les substances nutritives favorisant la croissance des levures du genre Candida.
► Ensemencement et incubation du milieu
À partir d’une gélose Sabouraud (cf supra, paragraphe 3.2.) incubée à 37 C
pendant 24 à 48 heures, prélever une colonie présumée du genre Candida et a
repiquer en faisant quelques stries dans le fond du tube, puis une strie termina c
légèrement en profondeur.
Incuber à 27 ± 1 °C pendant 24 à 48 heures.
► Lecture et interprétation du milieu
Rechercher au microscope les chlamydospores de Candida albicans dans les
zones filamenteuses développées.
S il n’y en a pas, ensemencer un nouveau tube de gélose PCB et incuber à
C pendant 48 heures.
Si I observation est toujours négative, la détermination de 1 espèce de C andida
Peut être faite par les techniques de l’auxanogramme (assimilation de sucres) et/
Ou du zymogramme (fermentation de sucres), intervenant maintenant dans les
mærométhodes d’identification (cf. infra, paragraphe 5.2.).
«
k ( ontrôle de qualité du milieu
La souche Candida albicans ATCC 2091 se développe sur la gélose PCB avec
Ponction de chlamydospores, après 48 à 72 heures d incubation a température