Enterobacteriaceae (entérobactéries)
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7.3.
Galeries API bioMérieux" SA
Plusieurs galeries API peuvent être utilisées pour l’identification des entérobactéries (c/. première partie, chapitre 3 « Préparation et stérilisation du matériel
et des milieux de culture », tableau 24) dont la galerie api® 20 E.
► Autres systèmes d’identification
Pour une identification automatisée, les systèmes VITEK (carte VITEK GNI+
pour bacilles Gram-) et VITEK® 2 Compact (carte VITEK 2 GN pour bacilles
Gram- fermentants ou non) peuvent également être utilisés (cf. documentation
bioMérieux® SA).
73.7. Présentation de la galerie api " 20 E
Pour la présentation générale des galeries API : cf. première partie, chapitre 3
«Préparation et stérilisation du matériel et des milieux de culture»,
paragraphe 4.3.2.
API 20 E est un système standardisé, conçu dans les années 1970 permettant
d’identifier aujourd’hui :
-21 genres d’entérobactéries, répartis en 70 espèces, sous-espèces ou biotypes ;
- 18 autres genres de bacilles Gram- dont les Aeromonas, Vibrio, Pseudomonas et vc-Pseudomonas...
73.2. Composition de la galerie
La galerie API 20 E est composée de 20 microtubes (surmontés de cupules)
contenant des substrats déshydratés, qui permettent de réaliser 21 tests biochimiques
du métabolisme respiratoire, glucidique et protéique (cf. infra, tableaux 96A et
96B). Le test oxydase constitue le 21e test d’identification à effectuer hors galerie.
Des tests complémentaires peuvent être réalisés (cf. infra, tableau 96C).
733. Préparation, inoculation et incubation de la galerie
• À partir d’une culture pure (de 18 à 24 heures) d’entérobactérie ou autre
bacille à Gram- identifiable sur la galerie API 20 E, préparer une suspension
bactérienne homogène dans une ampoule d’API NaCl 0,85 % Medium ou d API
Suspension Medium. Un tube contenant 5 mL d’eau physiologique stérile ou
d eau distillée stérile, sans additif, peut être utilisé pour préparer la suspension.
En cas de suspicion d’une espèce de Vibrio, bactérie halophile ou halotolérante, faire la suspension dans API NaCl 0,85 % Medium.
Inoculer la galerie suivant le mode opératoire du fabricant, en notant que .
- pour les tests CIT, VP, GEL, les tubes et les cupules doivent être remplis
avec la suspension bactérienne ;
- pour les tests ADH, LDC, ODC, H2S et URE, les cupules sont remplies
d huile de paraffine afin d’obtenir une anaérobiose.
Incuber à 36 ± 2 °C pendant 18 à 24 heures.
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Galeries API bioMérieux" SA
Plusieurs galeries API peuvent être utilisées pour l’identification des entérobactéries (c/. première partie, chapitre 3 « Préparation et stérilisation du matériel
et des milieux de culture », tableau 24) dont la galerie api® 20 E.
► Autres systèmes d’identification
Pour une identification automatisée, les systèmes VITEK (carte VITEK GNI+
pour bacilles Gram-) et VITEK® 2 Compact (carte VITEK 2 GN pour bacilles
Gram- fermentants ou non) peuvent également être utilisés (cf. documentation
bioMérieux® SA).
73.7. Présentation de la galerie api " 20 E
Pour la présentation générale des galeries API : cf. première partie, chapitre 3
«Préparation et stérilisation du matériel et des milieux de culture»,
paragraphe 4.3.2.
API 20 E est un système standardisé, conçu dans les années 1970 permettant
d’identifier aujourd’hui :
-21 genres d’entérobactéries, répartis en 70 espèces, sous-espèces ou biotypes ;
- 18 autres genres de bacilles Gram- dont les Aeromonas, Vibrio, Pseudomonas et vc-Pseudomonas...
73.2. Composition de la galerie
La galerie API 20 E est composée de 20 microtubes (surmontés de cupules)
contenant des substrats déshydratés, qui permettent de réaliser 21 tests biochimiques
du métabolisme respiratoire, glucidique et protéique (cf. infra, tableaux 96A et
96B). Le test oxydase constitue le 21e test d’identification à effectuer hors galerie.
Des tests complémentaires peuvent être réalisés (cf. infra, tableau 96C).
733. Préparation, inoculation et incubation de la galerie
• À partir d’une culture pure (de 18 à 24 heures) d’entérobactérie ou autre
bacille à Gram- identifiable sur la galerie API 20 E, préparer une suspension
bactérienne homogène dans une ampoule d’API NaCl 0,85 % Medium ou d API
Suspension Medium. Un tube contenant 5 mL d’eau physiologique stérile ou
d eau distillée stérile, sans additif, peut être utilisé pour préparer la suspension.
En cas de suspicion d’une espèce de Vibrio, bactérie halophile ou halotolérante, faire la suspension dans API NaCl 0,85 % Medium.
Inoculer la galerie suivant le mode opératoire du fabricant, en notant que .
- pour les tests CIT, VP, GEL, les tubes et les cupules doivent être remplis
avec la suspension bactérienne ;
- pour les tests ADH, LDC, ODC, H2S et URE, les cupules sont remplies
d huile de paraffine afin d’obtenir une anaérobiose.
Incuber à 36 ± 2 °C pendant 18 à 24 heures.