Enterobacteriaceae (entérobactéries)
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► Ensemencement et incubation du milieu
Suite de « ensemencement et incubation du milieu » du paragraphe supra 4.1.1.
Après incubation, reprendre le flacon de bouillon lactosé, l’homogénéiser et
prélever 10 mL du milieu (correspondant à 1 g ou 1 mL d’échantillon dans
l’exemple), qui constituent l’homogénéisat A.
Introduire cet homogénéisât A dans un flacon de bouillon Mossel.
Incuber entre 35 et 37 °C pendant 18 à 48 heures.
Effectuer des subcultures sur gélose VRBGL (cf infra, paragraphe 4.2.5.).
4.2. Milieux d’isolement sélectifs
4.2.1. Gélose Drigalski
La gélose Drigalski bioMérieux® SA est un milieu d'isolement sélectif et de
différentiation destiné à la recherche des entérobactéries et autres bactéries
Gram- (Pseudomonas), à partir des prélèvements cliniques.
4.2.1.1. Composition chimique et mode d'action du milieu de culture
► Composition chimique
La formule théorique de ce milieu de culture en g/L d'eau purifiée est :
Peptone de gélatine (bovin ou porcin)............................................... 15
Extrait de viande (bovin ou porcin)...................................................
3
Extrait de levure....................................................................................
3
Désoxycholate de sodium (bovin ou porcin)....................................
1
Thiosulfate de sodium...........................................................................
1
Lactose (bovin)...................................................................................... 15
Cristal violet........................................................................................... 0,005
Bleu de bromothymol...........................................................................
0,08
Agar....................................................................................................... 11
pH 7,4
5
Ce milieu est disponible en flacons ou en boîtes de Pétri prêtes à I emploi, de
i couleur verte.
’ ► Mode d’action
î Le désoxycholate de sodium et le cristal violet (colorant) sont des inhibiteurs
j des bactéries à Gram+.
J
Le lactose (disaccharide) peut être fermenté ou non par les entérobactéries. La
: fermentation du lactose produit des acides qui font virer le bleu de bromothymol
s (indicateur de pH) au jaune en milieu acide ; dans le cas contraire, le bleu de
bromothymol est bleu à bleu-vert.
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► Ensemencement et incubation du milieu
Suite de « ensemencement et incubation du milieu » du paragraphe supra 4.1.1.
Après incubation, reprendre le flacon de bouillon lactosé, l’homogénéiser et
prélever 10 mL du milieu (correspondant à 1 g ou 1 mL d’échantillon dans
l’exemple), qui constituent l’homogénéisat A.
Introduire cet homogénéisât A dans un flacon de bouillon Mossel.
Incuber entre 35 et 37 °C pendant 18 à 48 heures.
Effectuer des subcultures sur gélose VRBGL (cf infra, paragraphe 4.2.5.).
4.2. Milieux d’isolement sélectifs
4.2.1. Gélose Drigalski
La gélose Drigalski bioMérieux® SA est un milieu d'isolement sélectif et de
différentiation destiné à la recherche des entérobactéries et autres bactéries
Gram- (Pseudomonas), à partir des prélèvements cliniques.
4.2.1.1. Composition chimique et mode d'action du milieu de culture
► Composition chimique
La formule théorique de ce milieu de culture en g/L d'eau purifiée est :
Peptone de gélatine (bovin ou porcin)............................................... 15
Extrait de viande (bovin ou porcin)...................................................
3
Extrait de levure....................................................................................
3
Désoxycholate de sodium (bovin ou porcin)....................................
1
Thiosulfate de sodium...........................................................................
1
Lactose (bovin)...................................................................................... 15
Cristal violet........................................................................................... 0,005
Bleu de bromothymol...........................................................................
0,08
Agar....................................................................................................... 11
pH 7,4
5
Ce milieu est disponible en flacons ou en boîtes de Pétri prêtes à I emploi, de
i couleur verte.
’ ► Mode d’action
î Le désoxycholate de sodium et le cristal violet (colorant) sont des inhibiteurs
j des bactéries à Gram+.
J
Le lactose (disaccharide) peut être fermenté ou non par les entérobactéries. La
: fermentation du lactose produit des acides qui font virer le bleu de bromothymol
s (indicateur de pH) au jaune en milieu acide ; dans le cas contraire, le bleu de
bromothymol est bleu à bleu-vert.