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Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
La galerie api® 50 CH, en combinaison avec le milieu « API 50 CHB/E
Medium » est un système standardisé permettant d’identifier des Bacilli et apparentés, des Enterobacteriaceae et Vibrionaceae. Pour ces deux dernières
familles, la galerie doit être obligatoirement accompagnée de la galerie api® 20 E
(cf. deuxième partie, chapitre 5 « Enterobacteriaceae (entérobactéries) », paragraphe 7.3.), alors qu’elle est optionnelle pour les Bacilli.
La galerie api® 50 CH permet d’identifier :
- 17 espèces et biotypes de Bacilli : Bacillus amyloliquefaciens, B. anthracis,
B. cereus 1 et 2, B. circulons 1 et 2, B.coagulans, B.firmus, B.lentus,
B. licheniformis, B. megaterium 1 et 2, B. mycoides, B. pumilus, B. sphaericus,
B. stearothermophilus, B. subtilis ;
— 2 espèces de Brevibacillus : Brevibacillus brevis, Brevibacillus laterosporus \
- 2 espèces de Paenibacillus : Paenibacillus macerans, Phenibacillus polymyxa.
6.2.1. Composition de la galerie
Cette galerie est composée de 50 microtubes contenant des substrats déshydratés, qui appartiennent aux hydrates de carbone et dérivés (hétérosides, polyalcools, acides uroniques). Ils permettent de réaliser 50 tests de fermentation après
inoculation de la galerie avec API 50 CHB/E Medium.
La composition chimique de ce milieu en g/L d’eau déminéralisée est la suivante:
Sulfate d’ammonium.............................................................................. 2
Extrait de levure.................................................................................... 0,5
Tryptone (origine bovine/porcine)......................................................
1
Phosphate disodique................................ ............................................ 3,22
Phosphate monopotassique................................................................... 0,12
Solution d'oligo-éléments..................................................................... 10 mL
Rouge de phénol.................................................................................... 0,17
pH de 7,4 à 7,8 à 25 °C
Ce milieu est fourni en ampoules.
6.2.2. Préparation, inoculation et incubation des galeries API 50 CH et API
20 E
62.2.1. Préparation de la souche à identifier
• Vérifier que la souche bactérienne à identifier est pure et qu’elle possède les
propriétés caractéristiques du genre Bacillus : bacilles capables de sporuler. en
général Gram+, se développant en aérobiose (cf. supra, tableau 78).
• Préparer une culture de la souche sur un milieu nutritif gélosé dans plusieurs
boîtes de Pétri si la température optimale de la bactérie est inconnue et les
incuber à différentes températures.
• Préparer une culture dans deux boîtes de Pétri si la bactérie se développe
lentement afin d avoir suffisamment de germes :
o!?s
mésophiles poussent à une température comprise entre 25 et
45 °C pendant 16 à 18 heures ;
Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
La galerie api® 50 CH, en combinaison avec le milieu « API 50 CHB/E
Medium » est un système standardisé permettant d’identifier des Bacilli et apparentés, des Enterobacteriaceae et Vibrionaceae. Pour ces deux dernières
familles, la galerie doit être obligatoirement accompagnée de la galerie api® 20 E
(cf. deuxième partie, chapitre 5 « Enterobacteriaceae (entérobactéries) », paragraphe 7.3.), alors qu’elle est optionnelle pour les Bacilli.
La galerie api® 50 CH permet d’identifier :
- 17 espèces et biotypes de Bacilli : Bacillus amyloliquefaciens, B. anthracis,
B. cereus 1 et 2, B. circulons 1 et 2, B.coagulans, B.firmus, B.lentus,
B. licheniformis, B. megaterium 1 et 2, B. mycoides, B. pumilus, B. sphaericus,
B. stearothermophilus, B. subtilis ;
— 2 espèces de Brevibacillus : Brevibacillus brevis, Brevibacillus laterosporus \
- 2 espèces de Paenibacillus : Paenibacillus macerans, Phenibacillus polymyxa.
6.2.1. Composition de la galerie
Cette galerie est composée de 50 microtubes contenant des substrats déshydratés, qui appartiennent aux hydrates de carbone et dérivés (hétérosides, polyalcools, acides uroniques). Ils permettent de réaliser 50 tests de fermentation après
inoculation de la galerie avec API 50 CHB/E Medium.
La composition chimique de ce milieu en g/L d’eau déminéralisée est la suivante:
Sulfate d’ammonium.............................................................................. 2
Extrait de levure.................................................................................... 0,5
Tryptone (origine bovine/porcine)......................................................
1
Phosphate disodique................................ ............................................ 3,22
Phosphate monopotassique................................................................... 0,12
Solution d'oligo-éléments..................................................................... 10 mL
Rouge de phénol.................................................................................... 0,17
pH de 7,4 à 7,8 à 25 °C
Ce milieu est fourni en ampoules.
6.2.2. Préparation, inoculation et incubation des galeries API 50 CH et API
20 E
62.2.1. Préparation de la souche à identifier
• Vérifier que la souche bactérienne à identifier est pure et qu’elle possède les
propriétés caractéristiques du genre Bacillus : bacilles capables de sporuler. en
général Gram+, se développant en aérobiose (cf. supra, tableau 78).
• Préparer une culture de la souche sur un milieu nutritif gélosé dans plusieurs
boîtes de Pétri si la température optimale de la bactérie est inconnue et les
incuber à différentes températures.
• Préparer une culture dans deux boîtes de Pétri si la bactérie se développe
lentement afin d avoir suffisamment de germes :
o!?s
mésophiles poussent à une température comprise entre 25 et
45 °C pendant 16 à 18 heures ;