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Microbiologie pratique pour le laboratoire d'analyses ou de contrôle sanitaire
2.2.1.2. Ensemencement et incubation du milieu
Ensemencer, par exemple, avec des souches d’entérobactéries (Escherichia
coli, Enterobacter aerogenes...) des tubes de bouillon au rouge de phénol préparés avec du D(+)-glucose monohydraté, du saccharose et du L(+)-arabinose.
Ensemencer également des tubes ne contenant pas de composés réactionnels en
tant que contrôles de la croissance.
Incuber en aérobiose en général à 37 °C ou parfois à 30 °C (Serratia marcescens) pendant 24 heures et éventuellement jusqu'à 14 jours.
2.2.1.3. Lecture et interprétation du milieu
Le rouge de phénol, indicateur de pH, est rouge en milieu basique et jaune en
milieu acide (milieu non ensemencé rouge). La fermentation d'un glucide libère
des acides qui le font virer au jaune (glucide+) et éventuellement des gaz qui sont
recueillis dans la cloche de Durham.
Le test de gaz est pris en considération principalement lors de l’étude de la
dégradation du glucose ou du lactose. Si le volume de gaz est supérieur ou égal
au 1/10 du volume total de la cloche, le test gaz est dit positif. Cette règle du
1/10 est appliquée à plusieurs milieux de culture utilisés en bactériologie des
eaux et alimentaire (Delarras et Trébaol, 2003).
La lecture et l’interprétation de ce milieu sont données dans le tableau 56 pour
trois glucides.
Tableau 56 ■ Lecture et interprétation du bouillon au rouge de phénol additionné d un
glucide avec des entérobactéries et Staphylococcus aureus.
Entérobactéries
Couleur du milieu/glucide+ ouGaz dans la cloche de I)urham+ ouI)(+)-Glucose
Gaz
Saccharose
Gaz
L(+)-Arabinose
Gaz
Escherichia coli
Jaune/+
Gaz+
Rouge/-d
GazJaune/+
GazEnterococcus faecalis
ATCC 11700 *
Klebsiella pneumoniae
ATCC 13883 *
—
Jaune/+
GazJaune/+
Gaz-i------------------ -----Proteus mirabilis
Jaune/+
Gaz+
GazProteus vulgaris ATCC
13315 *
Jaune/+
Gaz+ (faible)
Salmonella Typhimurium
ATCC 14028 *
GazSerratia
marcescens
Jaune/+
Gaz+ d
Jaune/+
Gaz+
GazShigella Jiexneri ATCC
12022 *
Orange/±
GazStaphylococcus aureus
ATCC 25923 *
Jaune/+
Gaz_ ______ _ _____
(d> Suivant les souches. 26 à 75 *3 positives (Joly et Reynaud. 2003, d’après Brenner. 1984).
c» n ri e qua itc < e ce milieu, bonne croissance des souches bactériennes testées avec le saccharose.
Microbiologie pratique pour le laboratoire d'analyses ou de contrôle sanitaire
2.2.1.2. Ensemencement et incubation du milieu
Ensemencer, par exemple, avec des souches d’entérobactéries (Escherichia
coli, Enterobacter aerogenes...) des tubes de bouillon au rouge de phénol préparés avec du D(+)-glucose monohydraté, du saccharose et du L(+)-arabinose.
Ensemencer également des tubes ne contenant pas de composés réactionnels en
tant que contrôles de la croissance.
Incuber en aérobiose en général à 37 °C ou parfois à 30 °C (Serratia marcescens) pendant 24 heures et éventuellement jusqu'à 14 jours.
2.2.1.3. Lecture et interprétation du milieu
Le rouge de phénol, indicateur de pH, est rouge en milieu basique et jaune en
milieu acide (milieu non ensemencé rouge). La fermentation d'un glucide libère
des acides qui le font virer au jaune (glucide+) et éventuellement des gaz qui sont
recueillis dans la cloche de Durham.
Le test de gaz est pris en considération principalement lors de l’étude de la
dégradation du glucose ou du lactose. Si le volume de gaz est supérieur ou égal
au 1/10 du volume total de la cloche, le test gaz est dit positif. Cette règle du
1/10 est appliquée à plusieurs milieux de culture utilisés en bactériologie des
eaux et alimentaire (Delarras et Trébaol, 2003).
La lecture et l’interprétation de ce milieu sont données dans le tableau 56 pour
trois glucides.
Tableau 56 ■ Lecture et interprétation du bouillon au rouge de phénol additionné d un
glucide avec des entérobactéries et Staphylococcus aureus.
Entérobactéries
Couleur du milieu/glucide+ ouGaz dans la cloche de I)urham+ ouI)(+)-Glucose
Gaz
Saccharose
Gaz
L(+)-Arabinose
Gaz
Escherichia coli
Jaune/+
Gaz+
Rouge/-d
GazJaune/+
GazEnterococcus faecalis
ATCC 11700 *
Klebsiella pneumoniae
ATCC 13883 *
—
Jaune/+
GazJaune/+
Gaz-i------------------ -----Proteus mirabilis
Jaune/+
Gaz+
GazProteus vulgaris ATCC
13315 *
Jaune/+
Gaz+ (faible)
Salmonella Typhimurium
ATCC 14028 *
GazSerratia
marcescens
Jaune/+
Gaz+ d
Jaune/+
Gaz+
GazShigella Jiexneri ATCC
12022 *
Orange/±
GazStaphylococcus aureus
ATCC 25923 *
Jaune/+
Gaz_ ______ _ _____
(d> Suivant les souches. 26 à 75 *3 positives (Joly et Reynaud. 2003, d’après Brenner. 1984).
c» n ri e qua itc < e ce milieu, bonne croissance des souches bactériennes testées avec le saccharose.