100
Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
Tableau 30 (suite) ■ Technique de filtration sur membranes et applications.
Recherche et dénombrement de...
Normes
Légionella pneumophila et Légionella spp. dans les
eaux thermales, les réseaux d’eaux chaudes sanitaires. les tours aéro-réfrigérantes (Tar)...1
Norme NF T 90-431 (2003)
Norme ISO 11731-2 pour les eaux à
faible teneur en bactéries
Pseudomonas aeruginosa dans les eaux vendues en
bouteilles et en conteneurs, eaux de sources, eaux
minérales naturelles, eaux de piscines traitées au
PHMB1'
Norme NF EN 12780 (2002)
Salmonella dans les eaux douces superficielles peu
contaminées1
Projet de norme PR ISO/CD 6340-2
(juillet 2001)
Spores de bactéries anérobies sulfito-réductrices et de
Clostridia sulfitoréducteurs dans les eaux destinées à
la consommation humaine, les eaux minérales naturelles, les eaux de sources et les eaux thermales1
Norme NF EN 26461-2 (1993)
Staphylococcus aureus dans les eaux de piscines1 ;
staphylocoques pathogènes dans ces eaux (cf.
nouvelles normes 2006)
Norme NF T 90-421 (2006) et XPT
90-412 (2006)
* Chlorhydrate de polyhexaméthylène biguanide.
1. Cf. méthodes de travail Delarras et Trébaol, 2003.
2. Méthode d’analyse de référence pour la recherche des Escherichia coli dans certaines denrées alimentaires
d après le règlement (CE) n° 2073/2005 de la Commission des Communautés européennes du 15 novembre 2005.
3.2.2.5. Technique de dénombrement en anaérobiose
• Dans le cas des eaux, cette technique consiste à :
- mettre dans une série de tubes, 5 mL de l’échantillon ou d’une dilution décimale et à les traiter ou non au bain-marie à 80 ± 2 °C pendant 10 minutes selon
la norme utilisée ;
- ajouter dans chacun des tubes, après refroidissement entre 44 et 49 °C,
20 mL de gélose viande-foie-sulfite-citrate bio-Rad ou de gélose tryptose-sulfite
à la D-cyclosérine ou TSC Bio-Rad (cf. Delarras et Trébaol, 2003) et refroidir les
tubes sous l'eau froide.
Incuber les tubes à 37 °C ou à 46 °C pendant 24 à 48 heures selon les germes
recherchés.
► Remarques
l a gélose viande-toie-sulfîte-citrate Bio-Rad est maintenant dénommée
gélose viande-foie sulfite-fer (2006), le citrate de fer ammoniacal étant remplacé
par des sels de fer ;
- la gélose tryptose-sulfite à la D-cyclosérine ou TSC Bio-Rad est maintenant
désignée gélose ISC (Tryptone-sulfite-Cyclosérine) Bio-Rad ;
la technique de dénombrement en anaérobiose peut également être réalisée
en nte de Pétri, après filtration sur membrane de l’échantillon d’eau, selon la
norme NF EN 26461-2 citée dans le tableau 30.
• Dans le cas des aliments, cette technique peut être réalisée comme pour les
eaux, par incorporation d’un 1 mL d'une dilution à de la gélose viande-foiesulfne-citrate ou à de la gélose tryptose-sulfite à la D-cyclosérine Bio-Rad en
Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
Tableau 30 (suite) ■ Technique de filtration sur membranes et applications.
Recherche et dénombrement de...
Normes
Légionella pneumophila et Légionella spp. dans les
eaux thermales, les réseaux d’eaux chaudes sanitaires. les tours aéro-réfrigérantes (Tar)...1
Norme NF T 90-431 (2003)
Norme ISO 11731-2 pour les eaux à
faible teneur en bactéries
Pseudomonas aeruginosa dans les eaux vendues en
bouteilles et en conteneurs, eaux de sources, eaux
minérales naturelles, eaux de piscines traitées au
PHMB1'
Norme NF EN 12780 (2002)
Salmonella dans les eaux douces superficielles peu
contaminées1
Projet de norme PR ISO/CD 6340-2
(juillet 2001)
Spores de bactéries anérobies sulfito-réductrices et de
Clostridia sulfitoréducteurs dans les eaux destinées à
la consommation humaine, les eaux minérales naturelles, les eaux de sources et les eaux thermales1
Norme NF EN 26461-2 (1993)
Staphylococcus aureus dans les eaux de piscines1 ;
staphylocoques pathogènes dans ces eaux (cf.
nouvelles normes 2006)
Norme NF T 90-421 (2006) et XPT
90-412 (2006)
* Chlorhydrate de polyhexaméthylène biguanide.
1. Cf. méthodes de travail Delarras et Trébaol, 2003.
2. Méthode d’analyse de référence pour la recherche des Escherichia coli dans certaines denrées alimentaires
d après le règlement (CE) n° 2073/2005 de la Commission des Communautés européennes du 15 novembre 2005.
3.2.2.5. Technique de dénombrement en anaérobiose
• Dans le cas des eaux, cette technique consiste à :
- mettre dans une série de tubes, 5 mL de l’échantillon ou d’une dilution décimale et à les traiter ou non au bain-marie à 80 ± 2 °C pendant 10 minutes selon
la norme utilisée ;
- ajouter dans chacun des tubes, après refroidissement entre 44 et 49 °C,
20 mL de gélose viande-foie-sulfite-citrate bio-Rad ou de gélose tryptose-sulfite
à la D-cyclosérine ou TSC Bio-Rad (cf. Delarras et Trébaol, 2003) et refroidir les
tubes sous l'eau froide.
Incuber les tubes à 37 °C ou à 46 °C pendant 24 à 48 heures selon les germes
recherchés.
► Remarques
l a gélose viande-toie-sulfîte-citrate Bio-Rad est maintenant dénommée
gélose viande-foie sulfite-fer (2006), le citrate de fer ammoniacal étant remplacé
par des sels de fer ;
- la gélose tryptose-sulfite à la D-cyclosérine ou TSC Bio-Rad est maintenant
désignée gélose ISC (Tryptone-sulfite-Cyclosérine) Bio-Rad ;
la technique de dénombrement en anaérobiose peut également être réalisée
en nte de Pétri, après filtration sur membrane de l’échantillon d’eau, selon la
norme NF EN 26461-2 citée dans le tableau 30.
• Dans le cas des aliments, cette technique peut être réalisée comme pour les
eaux, par incorporation d’un 1 mL d'une dilution à de la gélose viande-foiesulfne-citrate ou à de la gélose tryptose-sulfite à la D-cyclosérine Bio-Rad en