Préparation et stérilisation du matériel et des milieux de culture
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Plusieurs milieux chromogéniques déshydratés Chromocuir sont également
proposés par VWR™ International (Merck) pour la détection des Escherichia
coli, des coliformes et des entérocoques dans les eaux ou les aliments.
4.3.3.3. Milieux fluorogéniques
Ce sont des milieux nutritifs classiques, additionnés d'un substrat fluorogène
spécifique d’une enzyme bactérienne ; celui-ci libère un composé qui produit une
fluorescence sous lumière ultraviolette (UV). Plusieurs substrats possédant cette
propriété sont utilisés dont le substrat 4-méthyl-umbelliféryl-P-D-glucuronide
(MUG) et le substrat 4-méthyl-umbelliféryl-P-D-gIucoside (MUD).
Le MUG, sous l’action de l’enzyme P-D-glucuronidase, enzyme spécifique de
Escherichia coli, libère du 4-méthyl-umbelliferon fluorescent sous UV. Il est utilisé notamment :
-dans le milieu MUG/EC de la microplaque Bio-Rad destiné au dénombrement des Escherichia coli et des bactéries coliformes dans les eaux de surfaces
et dans les eaux résiduaires par la méthode du NPP 96 (cf. première partie, chapitre 4 « Méthodes de travail en microbiologie », paragraphe 3.2.2.3.) ;
-dans les milieux nutritifs déshydratés liquides ou solides Fluoroculf’
VWR™ International (Merck) pour la mise en évidence rapide d’Escherichia coli
et des coliformes par la fluorescence en bactériologie clinique, des aliments ou
des eaux (c/. deuxième partie, chapitre 5 « Enterohacteriaceae
(entérobactéries) », paragraphe 7.1.3.) ;
-dans le milieu liquide Readycult® Coliformes 50 ou 100 VWR™ International chromogénique et fluorogénique, pour la détection des coliformes et des
Escherichia coli dans les eaux (Delarras et Trébaol, 2003).
Le MUD, sous l’action de l’enzyme P-D-glucosidase, enzyme spécifique des
entérocoques fécaux, libère du 4-méthyl-umbelliferon fluorescent sous UV.
Il est utilisé dans le milieu MUD/SF de la microplaque Bio-Rad destiné au
dénombrement des entérocoques dans les eaux de surfaces et dans les eaux résiduaires par la méthode du NPP 96 (cf. première partie, chapitre 4 « Méthodes de
travail en microbiologie », paragraphe 3.2.2.3. ; Delarras et Trébaol, 2003).
4.3.4. Détection ou identification de micro-organismes à l'aide d'automates
Des automates BioMérieux0’ SA permettent de détecter ou d’identifier des
micro-organismes :
- le système VIDAS, automate d'immunoanalyse, utilisé notamment en
microbiologie alimentaire pour la détection de certaines bactéries (Campylohacter, Escherichia coli O 157, Listeria...) ;
- le système VITEK, automate servant pour l’identification de germes et la réalisation d'antibiogrammes ( - le système VITEK® 2 Compact permettant d'identifier en 2 à 14 heures plus
de 330 espèces microbiennes et de réaliser des antibiogrammes.
Pour une présentation de ces systèmes et leurs applications, consulter la documentation BioMérieux® SA.
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Plusieurs milieux chromogéniques déshydratés Chromocuir sont également
proposés par VWR™ International (Merck) pour la détection des Escherichia
coli, des coliformes et des entérocoques dans les eaux ou les aliments.
4.3.3.3. Milieux fluorogéniques
Ce sont des milieux nutritifs classiques, additionnés d'un substrat fluorogène
spécifique d’une enzyme bactérienne ; celui-ci libère un composé qui produit une
fluorescence sous lumière ultraviolette (UV). Plusieurs substrats possédant cette
propriété sont utilisés dont le substrat 4-méthyl-umbelliféryl-P-D-glucuronide
(MUG) et le substrat 4-méthyl-umbelliféryl-P-D-gIucoside (MUD).
Le MUG, sous l’action de l’enzyme P-D-glucuronidase, enzyme spécifique de
Escherichia coli, libère du 4-méthyl-umbelliferon fluorescent sous UV. Il est utilisé notamment :
-dans le milieu MUG/EC de la microplaque Bio-Rad destiné au dénombrement des Escherichia coli et des bactéries coliformes dans les eaux de surfaces
et dans les eaux résiduaires par la méthode du NPP 96 (cf. première partie, chapitre 4 « Méthodes de travail en microbiologie », paragraphe 3.2.2.3.) ;
-dans les milieux nutritifs déshydratés liquides ou solides Fluoroculf’
VWR™ International (Merck) pour la mise en évidence rapide d’Escherichia coli
et des coliformes par la fluorescence en bactériologie clinique, des aliments ou
des eaux (c/. deuxième partie, chapitre 5 « Enterohacteriaceae
(entérobactéries) », paragraphe 7.1.3.) ;
-dans le milieu liquide Readycult® Coliformes 50 ou 100 VWR™ International chromogénique et fluorogénique, pour la détection des coliformes et des
Escherichia coli dans les eaux (Delarras et Trébaol, 2003).
Le MUD, sous l’action de l’enzyme P-D-glucosidase, enzyme spécifique des
entérocoques fécaux, libère du 4-méthyl-umbelliferon fluorescent sous UV.
Il est utilisé dans le milieu MUD/SF de la microplaque Bio-Rad destiné au
dénombrement des entérocoques dans les eaux de surfaces et dans les eaux résiduaires par la méthode du NPP 96 (cf. première partie, chapitre 4 « Méthodes de
travail en microbiologie », paragraphe 3.2.2.3. ; Delarras et Trébaol, 2003).
4.3.4. Détection ou identification de micro-organismes à l'aide d'automates
Des automates BioMérieux0’ SA permettent de détecter ou d’identifier des
micro-organismes :
- le système VIDAS, automate d'immunoanalyse, utilisé notamment en
microbiologie alimentaire pour la détection de certaines bactéries (Campylohacter, Escherichia coli O 157, Listeria...) ;
- le système VITEK, automate servant pour l’identification de germes et la réalisation d'antibiogrammes ( - le système VITEK® 2 Compact permettant d'identifier en 2 à 14 heures plus
de 330 espèces microbiennes et de réaliser des antibiogrammes.
Pour une présentation de ces systèmes et leurs applications, consulter la documentation BioMérieux® SA.