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Microbiologie pratique pour le laboratoire d analyses ou de contrôle sanitaire
4.3.3. Identification avec des milieux de confirmation
Ces milieux de culture sont à la fois des milieux d'isolement et/ou de dénombrement et des milieux qui permettent en totalité ou partiellement 1 identification
de bactéries.
4.3.3.1. Milieux de confirmation classiques
Ils peuvent encore être de conception classique telle que la gélose de BairdParker RPF bioMérieux® SA.
Cette gélose assure la recherche et le dénombrement sans confirmation des
staphylocoques à coagulase positive dans les denrées alimentaires (cf. deuxième
partie, chapitre 9 « Staphylococcus, Micrococcus et ex-Micrococcus », paragraphe 5.2.2. ; du plasma de lapin et du fibrinogène bovin, incorporés à ce milieu
permettent d'observer directement sur celui-ci le résultat du test coagulase.
4.3.3.2. Milieux chromogéniques
Depuis une quinzaine d’années environ, une nouvelle conception des milieux
d'identification est apparue, avec l'incorporation à des milieux de culture sélectifs, de substrats synthétiques chromogènes spécifiques d’enzymes bactériennes.
L'un des premiers milieux a été celui mis au point par Rambach en 1990 pour
l'identification directe des salmonelles : le Rambach® Agar VWR™ International (Merck) (Delarras et Trébaol, 2003).
Dans un milieu chromogénique, le milieu de base est conçu pour éliminer les
germes indésirables et pour favoriser les bactéries ciblées. Le substrat chromogène, spécifique d'une enzyme de ces bactéries, est décomposé en ses molécules
constitutives (en général deux), dont l’une est colorée à l’état libre. Celle-ci vient
alors colorer les colonies qui exprimeront ainsi un test enzymatique positif pour
ces germes. En général, deux activités enzymatiques (et parfois plus) peuvent
être testées sur le même milieu grâce à des substrats spécifiques appropriés.
Tous les fabricants proposent maintenant ce type de milieux de culture. En
voici quelques-uns destinés à la microbiologie des aliments et/ou des eaux :
— le milieu Rapid L. Mono Bio-Rad, utilisé pour la recherche des Listeria
monocytogenes dans tous produits d'alimentation humaine sans confirmation des
colonies observées (cf. Delarras et Trébaol, 2003) ;
- la gélose Rapid E.coli 2 avec supplément Bio-Rad, conçue pour dénombrer
directement, sans confirmation de colonies, les Escherichia coli et les autres coliformes dans les produits destinés à l'alimentation humaine et animale (cf Delarras et Trébaol. 2003) ;
la gélose Rapid Enterococcus Bio-Rad (cf. deuxième partie, chapitre 10
« Streptococcus et Enterococcus », paragraphe 6.1.2.) ;
la gélose SM ID 2 bioMérieux® SA. la gélose Coli ID bioMérieux® SA et la
gélose I BX (1 ryptone Bile X-Glucuronide) Bio-Rad (cf. deuxième partie, chapitre 5 « Enterobacteriaceae (entérobactéries) », paragraphes 5.2.3. et 7.1) ;
la gélose S. aureus ID bioMérieux" SA (cf. chapitre 9 « Staphylococcus.
Micrococcus et ex-Micrococcus). paragraphe 5.2.5.)
Microbiologie pratique pour le laboratoire d analyses ou de contrôle sanitaire
4.3.3. Identification avec des milieux de confirmation
Ces milieux de culture sont à la fois des milieux d'isolement et/ou de dénombrement et des milieux qui permettent en totalité ou partiellement 1 identification
de bactéries.
4.3.3.1. Milieux de confirmation classiques
Ils peuvent encore être de conception classique telle que la gélose de BairdParker RPF bioMérieux® SA.
Cette gélose assure la recherche et le dénombrement sans confirmation des
staphylocoques à coagulase positive dans les denrées alimentaires (cf. deuxième
partie, chapitre 9 « Staphylococcus, Micrococcus et ex-Micrococcus », paragraphe 5.2.2. ; du plasma de lapin et du fibrinogène bovin, incorporés à ce milieu
permettent d'observer directement sur celui-ci le résultat du test coagulase.
4.3.3.2. Milieux chromogéniques
Depuis une quinzaine d’années environ, une nouvelle conception des milieux
d'identification est apparue, avec l'incorporation à des milieux de culture sélectifs, de substrats synthétiques chromogènes spécifiques d’enzymes bactériennes.
L'un des premiers milieux a été celui mis au point par Rambach en 1990 pour
l'identification directe des salmonelles : le Rambach® Agar VWR™ International (Merck) (Delarras et Trébaol, 2003).
Dans un milieu chromogénique, le milieu de base est conçu pour éliminer les
germes indésirables et pour favoriser les bactéries ciblées. Le substrat chromogène, spécifique d'une enzyme de ces bactéries, est décomposé en ses molécules
constitutives (en général deux), dont l’une est colorée à l’état libre. Celle-ci vient
alors colorer les colonies qui exprimeront ainsi un test enzymatique positif pour
ces germes. En général, deux activités enzymatiques (et parfois plus) peuvent
être testées sur le même milieu grâce à des substrats spécifiques appropriés.
Tous les fabricants proposent maintenant ce type de milieux de culture. En
voici quelques-uns destinés à la microbiologie des aliments et/ou des eaux :
— le milieu Rapid L. Mono Bio-Rad, utilisé pour la recherche des Listeria
monocytogenes dans tous produits d'alimentation humaine sans confirmation des
colonies observées (cf. Delarras et Trébaol, 2003) ;
- la gélose Rapid E.coli 2 avec supplément Bio-Rad, conçue pour dénombrer
directement, sans confirmation de colonies, les Escherichia coli et les autres coliformes dans les produits destinés à l'alimentation humaine et animale (cf Delarras et Trébaol. 2003) ;
la gélose Rapid Enterococcus Bio-Rad (cf. deuxième partie, chapitre 10
« Streptococcus et Enterococcus », paragraphe 6.1.2.) ;
la gélose SM ID 2 bioMérieux® SA. la gélose Coli ID bioMérieux® SA et la
gélose I BX (1 ryptone Bile X-Glucuronide) Bio-Rad (cf. deuxième partie, chapitre 5 « Enterobacteriaceae (entérobactéries) », paragraphes 5.2.3. et 7.1) ;
la gélose S. aureus ID bioMérieux" SA (cf. chapitre 9 « Staphylococcus.
Micrococcus et ex-Micrococcus). paragraphe 5.2.5.)