Chap. 1. La cellule en action
(identique dans les deux sens de lecture) et l’hydrolysent. Elles sont utilisées pour
détecter le polymorphisme nucléotidique, obtenir des marqueurs ou lors des étapes
du clonage.
La PCR permet l’obtention d’un très grand nombre de copies d’une région particulière
d’ADN nommée ADN cible. On utilise deux courtes séquences d’ADN appelées
amorces qui s’hybrident à des sites complémentaires de la molécule et qui encadient
la région destinée à être amplifiée.
Remarque
La performance de la technique a considérablement augmenté avec l’utilisation de
la Taq polymérase qui est stable à la chaleur et est synthétisée par des bactéries
thermophiles.
La PCR est utilisée dans un grand nombre d’applications courantes, comme en
répression des fraudes et en criminologie.
En avril 2000, une énigme historique a été résolue grâce à une séquence d’ADN
mitochondrial : celle de l’Enfant mort au Temple en juin 1795. Cet ADN a été
prélevé sur un fragment de tissu cardiaque pétrifié conservé comme relique. Les
séquences d’ADN obtenues ont été amplifiées par PCR et ont montré la filiation
de l’enfant avec les femmes de la famille de Marie-Antoinette.
La transgenèse correspond à l’ajout ou au remplacement d’un gène. L’addition d’un
gène se réalise par micro-injection dans les pronuclei après fécondation ou à l’aide
de vecteurs viraux qui intègrent leur génome dans le génome de la cellule hôte. Le
remplacement est effectué par recombinaison homologue. Le gène étranger et le
gène ciblé doivent posséder une séquence identique. Le procédé fait appel au
processus naturel de réparation de l’ADN et nécessite des cellules en division. Les
applications médicales sont nombreuses :
• obtention de lapins transgéniques pour étudier l’athérosclérose et le SIDA ;
étude de 1 utilisation d’organes de porc tolérables par l’homme afin de réaliser des
transplantations ;
production de lait complémenté par des protéines protégeant le tractus digestif
contre des agents pathogènes ;
• fabrication de vaccins.
1.5 LES CELLULES SOUCHES ET LES CELLULES DIFFÉRENCIÉES
L'embryogenèse
Après la fécondation, la cellule œuf obtenue, destinée à devenir un organisme à part
entière, est une cellule totipotente, c est-à-dire capable de se transformer en n’importe
quelle cellule spécialisée.
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