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5.4.4.3. Le concept Ct (Threshold cycle)
Le concept du « cycle seuil » est à la base d’une quantification précise et reproductible. Les
valeurs de fluorescence sont enregistrées au cours de chaque cycle et représentent la quantité
d’amplicons produits en un point précis dans la réaction. Plus il y a de matrices (template) à
amplifier au départ de la réaction PCR, moins élevé sera le nombre de cycle requis pour
atteindre un point où le signal d’émission de fluorescence sera statistiquement et
significativement plus élevé que le bruit de fond. C’est le cycle seuil (Ct: threshold cycle).
La valeur du Ct peut être traduite en un résultat quantitatif en la comparant avec les valeurs
du Ct générées avec des matrices de quantification connues.
Equation de l’amplification de la PCR
• Xn = Xo x (1 + Ex)
n
• Xn = nombre de cibles au cycle n
• Xo = nombre initial de molécules cibles
• Ex = efficacité de la PCR
• n = nombre de cycles de PCR