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Chapitre 4. Hybridation moléculaire
C’est une technique basée sur les propriétés physico-chimique de l’ADN à savoir: la
complémentarité des bases AT/CG et la réversibilité de la séparation des brins (dénaturationrenaturation).
La dénaturation est due à la rupture des liaisons hydrogène à une forte température
(supérieure à la Tm) ou à pH alcalin.
Un refroidissement progressif favorise la réassociation des deux brins.
• Si les deux brins sont de la même origine on parle de renaturation
• Si les deux brins proviennent de deux origines différentes on parle d’hybridation
• Si les deux brins présentent 100% d’homologie, l’hybride est stable dans toutes les
conditions
• Si les deux brins ne présentent pas d’homologie: pas d’association
• Si les deux brins présentent une homologie partielle, l’hybride est stable dans les
conditions de faibles contraintes et instable dans les conditions de stringeance : faible
force ionique et la forte température
Figure 4.1. Phénomène de dénaturation et réassociation des molécules d’ADN en
fonction de la température