- chaque bassin d’un volume utile de 18 m 3 (3 m x 3 x 2) est équipé d’une pompe
immergée associée à un hydroéjecteur permettant un brassage et une saturation en O
2
constants dans la masse d’eau ;
- l’eau de mer naturelle est pompée dans la lagune du Brusc ;
- la pollution est créée par un apport de pétrole brut (Arabian Light) à raison de 4 litres
par bassin ;
- le traitement du pétrole brut est réalisé par apport d’un mélange de nutriments (Inipol
EAP 22) composé d’acide oléique, urée, phosphore (Sirvins et al, 1982). Sa quantité
ajoutée est de 10 % du volume de pétrole brut ;
- le pétrole brut seul ou additionné initialement de la solution nutritive est injecté au fond
de la masse d’eau (cas de fuite d’un puits de forage, etc.) ;
- l’essai dure 8 jours avec dans chaque bassin une eau non renouvelée.
Analyses
- Estimation d’abondance
La microflore hétérotrophe totale viable a été estimée par numérations indirectes sur
milieu Marine Agar Difco. Les prélèvements ont été réalisés dans les nappes et à - 25 cm : à
to, 2 h après pollution, 24 h, 48 h, 3 j, 4 j, 5 j, 7 j.
- Étude des souches
Les souches sont isolées à partir des milieux de numération et purifiées. L’échantillon
étudié est de 25 souches par prélèvement dans la nappe (to, 1 j, 4 j, 7 j) dans chacun des
bassins.
Ces souches sont caractérisées par :
. 16 tests de galeries API 20 B
52 tests de croissance substrats carbonés: Xylose, Glucose, Saccharose, Lactose,
Ribose, Mannose, Rhamnose, Alanine, Serine, Glycine, Aspartate, Asparagine, Leucine,
Glutamate, Arginine, Proline, Histidine, Tyrosine, Tryptophane, Malonate, Succinate,
Fumarate, Acétate, Proprionate, Caprylate, Caprate, Laurate, Palmitate, Stéarate,
Oléate, Glycérol, Sorbitol, Mannitol, Benzol, Glycollate, Pyruvate, Urée, Benzoate,
Pentane, Hexane, Hexadécane, Dodécane, Cyclohexane, Heptane, Toluène, Xylène,
Benzène, Eicosane, Gelatine, D-nase, Amidon, Tween.
. 10 tests physiologiques: croissance à 4°C, 12°C, 37°C, 45°C, 0‰, 75‰, 100°/oo,
175‰ ; Oxydase et Catalase.
Traitement des données
- Régressions
Calcul des équations définissant les croissances bactériennes en fonction du temps dans
l’échantillon (x, y) et dans l’estimation moyenne de la population (xo, yo). L’effectif de
l’échantillon étant petit, on n’utilisera pas le ot de la loi normale, mais la loi de Student
(Danielli, 1975).
Droite de régression de l’échantillon analysé : y = f (x)
x = temps (jours)
y = concentration bactérienne exprimée en log10 (bact.ml 1 )
Droite de régression estimée de la population : yo = f (xo)
xo— x= temps (jours)
yo = concentration bactérienne exprimée en logio (bact.ml1)
- intervalle de confiance de yo à la probabilité associée :
yo ± t.Syo
664
immergée associée à un hydroéjecteur permettant un brassage et une saturation en O
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constants dans la masse d’eau ;
- l’eau de mer naturelle est pompée dans la lagune du Brusc ;
- la pollution est créée par un apport de pétrole brut (Arabian Light) à raison de 4 litres
par bassin ;
- le traitement du pétrole brut est réalisé par apport d’un mélange de nutriments (Inipol
EAP 22) composé d’acide oléique, urée, phosphore (Sirvins et al, 1982). Sa quantité
ajoutée est de 10 % du volume de pétrole brut ;
- le pétrole brut seul ou additionné initialement de la solution nutritive est injecté au fond
de la masse d’eau (cas de fuite d’un puits de forage, etc.) ;
- l’essai dure 8 jours avec dans chaque bassin une eau non renouvelée.
Analyses
- Estimation d’abondance
La microflore hétérotrophe totale viable a été estimée par numérations indirectes sur
milieu Marine Agar Difco. Les prélèvements ont été réalisés dans les nappes et à - 25 cm : à
to, 2 h après pollution, 24 h, 48 h, 3 j, 4 j, 5 j, 7 j.
- Étude des souches
Les souches sont isolées à partir des milieux de numération et purifiées. L’échantillon
étudié est de 25 souches par prélèvement dans la nappe (to, 1 j, 4 j, 7 j) dans chacun des
bassins.
Ces souches sont caractérisées par :
. 16 tests de galeries API 20 B
52 tests de croissance substrats carbonés: Xylose, Glucose, Saccharose, Lactose,
Ribose, Mannose, Rhamnose, Alanine, Serine, Glycine, Aspartate, Asparagine, Leucine,
Glutamate, Arginine, Proline, Histidine, Tyrosine, Tryptophane, Malonate, Succinate,
Fumarate, Acétate, Proprionate, Caprylate, Caprate, Laurate, Palmitate, Stéarate,
Oléate, Glycérol, Sorbitol, Mannitol, Benzol, Glycollate, Pyruvate, Urée, Benzoate,
Pentane, Hexane, Hexadécane, Dodécane, Cyclohexane, Heptane, Toluène, Xylène,
Benzène, Eicosane, Gelatine, D-nase, Amidon, Tween.
. 10 tests physiologiques: croissance à 4°C, 12°C, 37°C, 45°C, 0‰, 75‰, 100°/oo,
175‰ ; Oxydase et Catalase.
Traitement des données
- Régressions
Calcul des équations définissant les croissances bactériennes en fonction du temps dans
l’échantillon (x, y) et dans l’estimation moyenne de la population (xo, yo). L’effectif de
l’échantillon étant petit, on n’utilisera pas le ot de la loi normale, mais la loi de Student
(Danielli, 1975).
Droite de régression de l’échantillon analysé : y = f (x)
x = temps (jours)
y = concentration bactérienne exprimée en log10 (bact.ml 1 )
Droite de régression estimée de la population : yo = f (xo)
xo— x= temps (jours)
yo = concentration bactérienne exprimée en logio (bact.ml1)
- intervalle de confiance de yo à la probabilité associée :
yo ± t.Syo
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