Analyse bactériologique
Les indicateurs fécaux usuels : coliformes thermorésistants et Streptocoques D ont été
dénombrés par technique d’ensemencements multiples en milieu liquide (3 tubes par
dilution).
Les Streptocoques D ont été dénombrés par ensemencement sur bouillon lactosé au
bromocrésol pourpre, avec cloche, incubé à 30°C 48 heures, puis subculture sur bouillon
lactosé bilié au Vert Brillant incubé à 44°C.
La numération des Streptocoques D a été réalisée sur milieu de Rothe avec subculture sur
milieu de Litsky à l’azide et Ethyl violet (incubation à 37°C).
La recherche des Salmonelles a été réalisée par méthode semi-quantitative, portant soit
sur 250 ml d’eau, soit sur 25 ml du contenu des bivalves.
La préparation de moules est broyée en milieu de pré-enrichissement (eau peptonée
tamponnée), qui est incubé pendant 16 heures à 37°C.
Les 250 ml d’eau sont filtrés sur membrane qui est ensemencée en eau peptonée
tamponnée.
Après incubation, 2 ml du pré-enrichissement sont inoculés dans 20 ml de milieu d’enrichissement. Dans la plupart des cas, un double enrichissement a été réalisé :
- sur milieu Tetrathionate au Vert Brillant incubé à 43°C,
- sur milieu au Sélénite incubé à 37°C.
Après 24 heures d’incubation des isolements sont réalisés à partir de ces enrichissements
sur gélose au Vert Brillant (BGA) et gélose Salmonella Shigella (SS).
Les colonies suspectes ont été caractérisées, et lorsque l’appartenance au gere Salmonella
a été établie, les souches ont été soumises au sérotypage qui a été confirmé dans certains
cas par le centre des Salmonella.
RÉSULTATS
Etude comparée de la contamination de l’eau et des moules
Les résultats des dénombrements d’indicateurs rapportés à 100 ml d’eau ou 100 ml du
contenu de moules ont été figurés en fonction du temps (fig. 1), et résumés dans un tableau
(Tab. 1).
Eau
Moules
Coliformes
Streptocoques
Coliformes
Streptocoques
Fécaux (CFE)
Fécaux (SFE)
Fécaux (CFM)
Fécaux (SFM)
Nombre de
prélèvements
56
56
56
56
Moyenne des
valeurs Log
2,70
1,86
3,82
4,26
Ecart type
0,85
1,08
0,78
0,76
Coefficient de
variation (%)
31,4
58,0
20,4
17,8
Moyenne
5,0 10 2
7,2 10 1
6,6 103
1,8 10 4
Tableau 1 : Résultats des dénombrements comparés sur eau et moules.
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Les indicateurs fécaux usuels : coliformes thermorésistants et Streptocoques D ont été
dénombrés par technique d’ensemencements multiples en milieu liquide (3 tubes par
dilution).
Les Streptocoques D ont été dénombrés par ensemencement sur bouillon lactosé au
bromocrésol pourpre, avec cloche, incubé à 30°C 48 heures, puis subculture sur bouillon
lactosé bilié au Vert Brillant incubé à 44°C.
La numération des Streptocoques D a été réalisée sur milieu de Rothe avec subculture sur
milieu de Litsky à l’azide et Ethyl violet (incubation à 37°C).
La recherche des Salmonelles a été réalisée par méthode semi-quantitative, portant soit
sur 250 ml d’eau, soit sur 25 ml du contenu des bivalves.
La préparation de moules est broyée en milieu de pré-enrichissement (eau peptonée
tamponnée), qui est incubé pendant 16 heures à 37°C.
Les 250 ml d’eau sont filtrés sur membrane qui est ensemencée en eau peptonée
tamponnée.
Après incubation, 2 ml du pré-enrichissement sont inoculés dans 20 ml de milieu d’enrichissement. Dans la plupart des cas, un double enrichissement a été réalisé :
- sur milieu Tetrathionate au Vert Brillant incubé à 43°C,
- sur milieu au Sélénite incubé à 37°C.
Après 24 heures d’incubation des isolements sont réalisés à partir de ces enrichissements
sur gélose au Vert Brillant (BGA) et gélose Salmonella Shigella (SS).
Les colonies suspectes ont été caractérisées, et lorsque l’appartenance au gere Salmonella
a été établie, les souches ont été soumises au sérotypage qui a été confirmé dans certains
cas par le centre des Salmonella.
RÉSULTATS
Etude comparée de la contamination de l’eau et des moules
Les résultats des dénombrements d’indicateurs rapportés à 100 ml d’eau ou 100 ml du
contenu de moules ont été figurés en fonction du temps (fig. 1), et résumés dans un tableau
(Tab. 1).
Eau
Moules
Coliformes
Streptocoques
Coliformes
Streptocoques
Fécaux (CFE)
Fécaux (SFE)
Fécaux (CFM)
Fécaux (SFM)
Nombre de
prélèvements
56
56
56
56
Moyenne des
valeurs Log
2,70
1,86
3,82
4,26
Ecart type
0,85
1,08
0,78
0,76
Coefficient de
variation (%)
31,4
58,0
20,4
17,8
Moyenne
5,0 10 2
7,2 10 1
6,6 103
1,8 10 4
Tableau 1 : Résultats des dénombrements comparés sur eau et moules.
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