Recherches de Biologie et d’Océanographie Médicale (CERBOM) (6 marines, 3 terrestres) : Vibrio alginolyticus CIP 7065, Vibrio anguillarum CCM 6336, Vibrio sp. CCM
5959, Pseudomonasputrefaciens CERBOM, Pseudomonas sp. CERBOM, Alteromonas
citrea ATCC 29719, Staphylococcus aureus CIP 209 P, Escherichia coli CIP 2518,
Bacillus subtilis CIP 1722.
Tests de chimiotactisme :
Ils ont été réalisés par la technique de Young et Mitchell (1973), sur les extraits aqueux des
cellules totales contenues dans 10 litres d’eau du bassin vis-à-vis de Vibrio alginolyticus.
Chromatographie des extraits aqueux sur gel :
Elle a été réalisée sur gel Ultrogel c Ac A 202 en colonne (diamètre int. 13 mm, L = 55 cm)
équilibrée par du tampon TRIS-HCL 0,01 M pH 8 - NaCl 0,3M (débit : 0,6 ml par minute,
échantillon appliqué : 0,5 ml). La DO de l’éluat a été mesurée en continu à 265 nm.
L’étalonnage de la colonne a été réalisé à l’aide du dextran c bleu (PM 2.10 6 ) et du N AD c
(PM 876). L’activité antibiotique des fractions recueillies a été testée par la méthode de
l’antibiogramme décrite ci-dessus, vis-à-vis de V. anguillarum et P. putrefaciens.
Mise en évidence des substances antialgales :
Tests d’inhibition :
Ils ont été effectués aux mêmes périodes de la culture et ils ont concerné les mêmes
matériaux, à savoir les eaux concentrées (antialgaux solubles ou AAS) et les cellules
phytoplanctoniques (antialgaux particulaires hydrosolubles, ou AAPH, et extraits lipidiques ou AAPL). Les antibiogrammes ont été réalisés sur milieu gélosé adapté à la
culture d’algues : eau de mer artificielle (Lyman et Fleming, 1940), 1000 ml ; agar noble
(Difco), 15 g; solution ES de Provasoli (Aubert et al., 1966), 20 ml. Quatres souches
d’algues axènes (collection CERBOM) se développant bien sur milieu solide ont été
utilisées pour ces tests: Navicula incerta (C\72),Phaeodactylum tricornutum (073),7etraselmis maculata (C 170) et Dunaliella salina (C 176). L’incubation des plaques inoculées
a été réalisée à 20°C, sous un éclairement de 5000 lux avec une alternance de 12 heures de
lumière et de 12 heures d’obscurité pendant 10 jours.
Figure 1 : Variations de la concentration en chlorophylle a dans l’eau du bassin expérimental du 13 avril au 13
mai.
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5959, Pseudomonasputrefaciens CERBOM, Pseudomonas sp. CERBOM, Alteromonas
citrea ATCC 29719, Staphylococcus aureus CIP 209 P, Escherichia coli CIP 2518,
Bacillus subtilis CIP 1722.
Tests de chimiotactisme :
Ils ont été réalisés par la technique de Young et Mitchell (1973), sur les extraits aqueux des
cellules totales contenues dans 10 litres d’eau du bassin vis-à-vis de Vibrio alginolyticus.
Chromatographie des extraits aqueux sur gel :
Elle a été réalisée sur gel Ultrogel c Ac A 202 en colonne (diamètre int. 13 mm, L = 55 cm)
équilibrée par du tampon TRIS-HCL 0,01 M pH 8 - NaCl 0,3M (débit : 0,6 ml par minute,
échantillon appliqué : 0,5 ml). La DO de l’éluat a été mesurée en continu à 265 nm.
L’étalonnage de la colonne a été réalisé à l’aide du dextran c bleu (PM 2.10 6 ) et du N AD c
(PM 876). L’activité antibiotique des fractions recueillies a été testée par la méthode de
l’antibiogramme décrite ci-dessus, vis-à-vis de V. anguillarum et P. putrefaciens.
Mise en évidence des substances antialgales :
Tests d’inhibition :
Ils ont été effectués aux mêmes périodes de la culture et ils ont concerné les mêmes
matériaux, à savoir les eaux concentrées (antialgaux solubles ou AAS) et les cellules
phytoplanctoniques (antialgaux particulaires hydrosolubles, ou AAPH, et extraits lipidiques ou AAPL). Les antibiogrammes ont été réalisés sur milieu gélosé adapté à la
culture d’algues : eau de mer artificielle (Lyman et Fleming, 1940), 1000 ml ; agar noble
(Difco), 15 g; solution ES de Provasoli (Aubert et al., 1966), 20 ml. Quatres souches
d’algues axènes (collection CERBOM) se développant bien sur milieu solide ont été
utilisées pour ces tests: Navicula incerta (C\72),Phaeodactylum tricornutum (073),7etraselmis maculata (C 170) et Dunaliella salina (C 176). L’incubation des plaques inoculées
a été réalisée à 20°C, sous un éclairement de 5000 lux avec une alternance de 12 heures de
lumière et de 12 heures d’obscurité pendant 10 jours.
Figure 1 : Variations de la concentration en chlorophylle a dans l’eau du bassin expérimental du 13 avril au 13
mai.
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