Function and metabolism
Our hypothesis is that this effect of alkyl-Gro could be mediated by
the production of the PKC inhibitor, alkyl-acyl-Gro. This effect of
alkyl-Gro could be of interest in several pathophysiological conditions.
Résumé
Les 1-O-alkylglycérols (alkyl-Gro) sont des substances naturelles abondantes dans l’huile de foie de requin et qui protègent les patients contre
les effets indésirables de certaines radiothérapies et inhibent la croissance de tumeurs cancéreuses. Leur mécanisme d’action est mal connu.
II pourrait résulter de l’incorporation des alkyl-Gro dans les phospholipides (PL) membranaires et, de là, interférer soit directement, soit par
la production de métabolites avec les signaux cellulaires impliquant
l’activation de la protéine-kinase C (PKC) par de seconds messagers
lipidiques.
Nous avons étudié la cinétique d’incorporation des [’H]-alkyl-Gro
(10 - 5 M, 92,5 mCi/mmol) dans ies PL de cellules endothéliales d’aortes
porcines (PAEC), puis l’influence des alkyl-Gro sur la perméabilité qui
est une fonction dépendante de la PKC en utilisant des cultures de PAEC
sur support poreux. Les cellules ont été incubées 24 h avec des alkylGro ( 10 - 5 M), puis le flux transendothélial d’albumine a été mesuré en
conditions basales ou après stimulation par le calcium ionophore A23187
( 10 - 6 M ) ou par des esters de phorbol (PMA) (2.10 -7 M) qui activent la
PKC. Enfin, après incorporation de [
3 H]-alkyl-Gro (24 h, 10'
5 M,
370 mCi/mmol), nous avons mesuré la production de [
3 H]-l-O-alkyl2-acylglycérol ([
3 H]-alkyl-acyl-Gro) après 2 mn de stimulation par le
PMA (2.10 -7 M) ou par le A23187 (10 - 6 M).
Nos résultats montrent que les [
3 H]-alkyl-Gro s’incorporent principalement dans la phosphatidylcholine (PC) et 6,58 ± 0,35 % de la
radioactivité initiale ont été incorporés dans la PC après 24 h d’incubation. Le PMA et le A23187 ont augmenté significativement la perméabilité à l’albumine, respectivement de 38.88 ± 16.81 % (p < 0,005,
n = 8) et de 43,41 ± 6,55 % (p < 0,005, n = 5) au-dessus du contrôle.
Après incorporation d’alkyl-Gro, la perméabilité basale n’a pas été
modifiée mais l’augmentation de la perméabilité induite par le PMA a
été abolie et la stimulation par le A23187 a produit une décroissance
de perméabilité de 35,45 ± 9,76 % au-dessous du niveau du contrôle
non stimulé. En parallèle, nous avons observé que la stimulation par
le calcium ionophore pendant 2 mn a augmenté la production de [ 3 H]alkyl-acyl-Gro (58,14 ± 9,28 % au-dessus du contrôle, p < 0,01, n= 12)
par les PAEC qui avaient été incubées en présence de [’H]-alkyl-Gro (24 h,
10 - 5 M), alors que le PMA s'est montré sans effet sur cette production.
Cette étude montre que les alkyl-Gro s’incorporent principalement
dans la PC des PAEC et qu’il en résulte une inhibition de l’augmentation de la perméabilité provoquée par le A23187 et le PMA. Notre
hypothèse est que cet effet résulte de la production d’alkyl-acyl-Gro,
un inhibiteur de PKC. Ces propriétés des alkyl-Gro peuvent présenter
un intérêt dans différentes conditions physiopathologiques.
147
Our hypothesis is that this effect of alkyl-Gro could be mediated by
the production of the PKC inhibitor, alkyl-acyl-Gro. This effect of
alkyl-Gro could be of interest in several pathophysiological conditions.
Résumé
Les 1-O-alkylglycérols (alkyl-Gro) sont des substances naturelles abondantes dans l’huile de foie de requin et qui protègent les patients contre
les effets indésirables de certaines radiothérapies et inhibent la croissance de tumeurs cancéreuses. Leur mécanisme d’action est mal connu.
II pourrait résulter de l’incorporation des alkyl-Gro dans les phospholipides (PL) membranaires et, de là, interférer soit directement, soit par
la production de métabolites avec les signaux cellulaires impliquant
l’activation de la protéine-kinase C (PKC) par de seconds messagers
lipidiques.
Nous avons étudié la cinétique d’incorporation des [’H]-alkyl-Gro
(10 - 5 M, 92,5 mCi/mmol) dans ies PL de cellules endothéliales d’aortes
porcines (PAEC), puis l’influence des alkyl-Gro sur la perméabilité qui
est une fonction dépendante de la PKC en utilisant des cultures de PAEC
sur support poreux. Les cellules ont été incubées 24 h avec des alkylGro ( 10 - 5 M), puis le flux transendothélial d’albumine a été mesuré en
conditions basales ou après stimulation par le calcium ionophore A23187
( 10 - 6 M ) ou par des esters de phorbol (PMA) (2.10 -7 M) qui activent la
PKC. Enfin, après incorporation de [
3 H]-alkyl-Gro (24 h, 10'
5 M,
370 mCi/mmol), nous avons mesuré la production de [
3 H]-l-O-alkyl2-acylglycérol ([
3 H]-alkyl-acyl-Gro) après 2 mn de stimulation par le
PMA (2.10 -7 M) ou par le A23187 (10 - 6 M).
Nos résultats montrent que les [
3 H]-alkyl-Gro s’incorporent principalement dans la phosphatidylcholine (PC) et 6,58 ± 0,35 % de la
radioactivité initiale ont été incorporés dans la PC après 24 h d’incubation. Le PMA et le A23187 ont augmenté significativement la perméabilité à l’albumine, respectivement de 38.88 ± 16.81 % (p < 0,005,
n = 8) et de 43,41 ± 6,55 % (p < 0,005, n = 5) au-dessus du contrôle.
Après incorporation d’alkyl-Gro, la perméabilité basale n’a pas été
modifiée mais l’augmentation de la perméabilité induite par le PMA a
été abolie et la stimulation par le A23187 a produit une décroissance
de perméabilité de 35,45 ± 9,76 % au-dessous du niveau du contrôle
non stimulé. En parallèle, nous avons observé que la stimulation par
le calcium ionophore pendant 2 mn a augmenté la production de [ 3 H]alkyl-acyl-Gro (58,14 ± 9,28 % au-dessus du contrôle, p < 0,01, n= 12)
par les PAEC qui avaient été incubées en présence de [’H]-alkyl-Gro (24 h,
10 - 5 M), alors que le PMA s'est montré sans effet sur cette production.
Cette étude montre que les alkyl-Gro s’incorporent principalement
dans la PC des PAEC et qu’il en résulte une inhibition de l’augmentation de la perméabilité provoquée par le A23187 et le PMA. Notre
hypothèse est que cet effet résulte de la production d’alkyl-acyl-Gro,
un inhibiteur de PKC. Ces propriétés des alkyl-Gro peuvent présenter
un intérêt dans différentes conditions physiopathologiques.
147