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Efflorescences toxiques des eaux côtières françaises :écologie. écophysiologie, toxicologie
Colonne
Débit
sil ice C-8, 150 ou 250 x 4,6 mm, 5 ou 10 1-1m
0,7- 0,8 ml/mn
Température colonne
21-25 oc toxines A
Éluants:
Oxydant:
Toxines A;
Toxines B:
Toxines C:
21-23 oc toxines B
30 oc toxines C
Cl sulfonate 2 mM
Phosph. amm. 30 mM
Acétonotrile 5%
pH 6,9-7,0
Cl sulfonate 2 mM
Phosph. amm. 10 mM
pH 7,2
Tétrabutylammonium 1 mM
pH 5, 8-6, 2
H 5 10 6 : 7 mM
Na 2 HP0 3 .H 2 0 50 mM
pH 9,00
Acide:
0,4 ml/mn
Température réaction :
Toxines A 50 oc
Toxines B 30 oc
Toxines C 45 oc
2ml
Volume réaction
Détecteur
excitation 330 mm,
émission 390 nm
Tableau 2 - Conditions chromatographiques de la méthode Oshima (modifiées par M. Ledoux).
CH 3 COOH 0,5 M
0,4 ml/mn
En fait, la plupart des variations sont liées à la
nature de la colonne et à la géométrie du système
CLHP/SRPC. JI est conseillé donc à tout utilisateur de cette méthode :
- de commencer strictement avec les conditions
préconisées par Oshima, puis de faire varier le pH
de la phase mobile (pour toutes les toxines) et le
pourcentage d'acétonitrile (pour les toxines A) jusqu'à optimisation de la séparation ;
-de s'assurer de la stabilité des temps de rétention
en maîtrisant la température de la colonne et
éventuel lement en renforçant la force tampon
(toxines C, [TBA) = 2 mM).
drium tamarense « MOG 835 », d' Alexandrium
minutum « AM 90 BM » et d' Alexandrium fundyense « Af 93.2 ». Ces extraits contiennent des
toxines Cl et C2, avec prédominance de la forme
fi (Toxine C2) (fig. 2, p. 123). Cette méthode a également été utilisée pour confirmer la présence de
Gonyautoxines dans des moules naturellement
contaminées, provenant des côtes vendéennes
(novembre 1992) (fig. 3, p. 124). Cependant, dans
le cas de certains extraits très chargés en composés fluorescents non toxiniques, l' interprétation
des chromatogrammes est aussi délicate qu' en
utilisant la méthode Sullivan (fig. 4, p. 124).
Cette méthode a été utilisée pour démontrer la
présence de toxines C dans des extraits d'A lex an-
Efflorescences toxiques des eaux côtières françaises :écologie. écophysiologie, toxicologie
Colonne
Débit
sil ice C-8, 150 ou 250 x 4,6 mm, 5 ou 10 1-1m
0,7- 0,8 ml/mn
Température colonne
21-25 oc toxines A
Éluants:
Oxydant:
Toxines A;
Toxines B:
Toxines C:
21-23 oc toxines B
30 oc toxines C
Cl sulfonate 2 mM
Phosph. amm. 30 mM
Acétonotrile 5%
pH 6,9-7,0
Cl sulfonate 2 mM
Phosph. amm. 10 mM
pH 7,2
Tétrabutylammonium 1 mM
pH 5, 8-6, 2
H 5 10 6 : 7 mM
Na 2 HP0 3 .H 2 0 50 mM
pH 9,00
Acide:
0,4 ml/mn
Température réaction :
Toxines A 50 oc
Toxines B 30 oc
Toxines C 45 oc
2ml
Volume réaction
Détecteur
excitation 330 mm,
émission 390 nm
Tableau 2 - Conditions chromatographiques de la méthode Oshima (modifiées par M. Ledoux).
CH 3 COOH 0,5 M
0,4 ml/mn
En fait, la plupart des variations sont liées à la
nature de la colonne et à la géométrie du système
CLHP/SRPC. JI est conseillé donc à tout utilisateur de cette méthode :
- de commencer strictement avec les conditions
préconisées par Oshima, puis de faire varier le pH
de la phase mobile (pour toutes les toxines) et le
pourcentage d'acétonitrile (pour les toxines A) jusqu'à optimisation de la séparation ;
-de s'assurer de la stabilité des temps de rétention
en maîtrisant la température de la colonne et
éventuel lement en renforçant la force tampon
(toxines C, [TBA) = 2 mM).
drium tamarense « MOG 835 », d' Alexandrium
minutum « AM 90 BM » et d' Alexandrium fundyense « Af 93.2 ». Ces extraits contiennent des
toxines Cl et C2, avec prédominance de la forme
fi (Toxine C2) (fig. 2, p. 123). Cette méthode a également été utilisée pour confirmer la présence de
Gonyautoxines dans des moules naturellement
contaminées, provenant des côtes vendéennes
(novembre 1992) (fig. 3, p. 124). Cependant, dans
le cas de certains extraits très chargés en composés fluorescents non toxiniques, l' interprétation
des chromatogrammes est aussi délicate qu' en
utilisant la méthode Sullivan (fig. 4, p. 124).
Cette méthode a été utilisée pour démontrer la
présence de toxines C dans des extraits d'A lex an-