Chapitre II : Matériel et méthodes
39
4.2.3.2.2.
Mode opératoire
L’ensemencement se fait en surface selon les étapes suivantes
- Déposer, devant un bec bunsen, 15 à 20 ml du milieu gélosé Enterococcus, fondu et ramené
à 47°C, dans des boîtes de Pétri stériles et le laisser se solidifier.
- déposer en surface 1 ml (20 gouttes environ) de la suspension mère (10
-1 ) et des dilutions
décimales (10
-2 et 10
-3 ).
- Etaler les gouttes déposées à l’aide d’un râteau.
- Incuber, l’ensemble ainsi préparé, à 35°C durant 48 heures.
4.2.3.2.3.
Lecture et dénombrement
Dénombrer les colonies suspectes, bombées de couleur rouge bordeaux caractéristiques des
streptocoques fécaux sur le milieu gélosé Enterococcus.
Test de confirmation
On prélève des colonies rouges et on ensemence par stries une gélose BEA (Bile Esculine
Azide). Après incubation à 37 °C pendant 24 h. La couleur noire (production de H2S)
confirme la présence des streptocoques fécaux. Les résultats sont exprimés en UFC.g
-1
4.2.4. Dénombrement des anaérobies sulfito-réducteurs
4.2.4.1. Définition
Les germes ASR (anaérobies sulfito-réducteurs) sont des bacilles à Gram positif, se
développant en anaérobiose à 37°C, donnant des colonies typiques réduisant le sulfite de
sodium. Les ASR sont représentés essentiellement par deux espèces responsables de toxicoinfections alimentaires (Clostridium perfringens et Clostridium botulinum), ces deux
espèces sont considérées comme « germes tests » pour l’appréciation de la qualité
hygiénique des denrées alimentaires (Marjorie, 1987).
L’intérêt de la recherche de tels indicateurs réside dans la propriété qu'ils sporulent, ce qui
les rend particulièrement résistants aux traitements de désinfection (Marjorie, 1987).
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4.2.3.2.2.
Mode opératoire
L’ensemencement se fait en surface selon les étapes suivantes
- Déposer, devant un bec bunsen, 15 à 20 ml du milieu gélosé Enterococcus, fondu et ramené
à 47°C, dans des boîtes de Pétri stériles et le laisser se solidifier.
- déposer en surface 1 ml (20 gouttes environ) de la suspension mère (10
-1 ) et des dilutions
décimales (10
-2 et 10
-3 ).
- Etaler les gouttes déposées à l’aide d’un râteau.
- Incuber, l’ensemble ainsi préparé, à 35°C durant 48 heures.
4.2.3.2.3.
Lecture et dénombrement
Dénombrer les colonies suspectes, bombées de couleur rouge bordeaux caractéristiques des
streptocoques fécaux sur le milieu gélosé Enterococcus.
Test de confirmation
On prélève des colonies rouges et on ensemence par stries une gélose BEA (Bile Esculine
Azide). Après incubation à 37 °C pendant 24 h. La couleur noire (production de H2S)
confirme la présence des streptocoques fécaux. Les résultats sont exprimés en UFC.g
-1
4.2.4. Dénombrement des anaérobies sulfito-réducteurs
4.2.4.1. Définition
Les germes ASR (anaérobies sulfito-réducteurs) sont des bacilles à Gram positif, se
développant en anaérobiose à 37°C, donnant des colonies typiques réduisant le sulfite de
sodium. Les ASR sont représentés essentiellement par deux espèces responsables de toxicoinfections alimentaires (Clostridium perfringens et Clostridium botulinum), ces deux
espèces sont considérées comme « germes tests » pour l’appréciation de la qualité
hygiénique des denrées alimentaires (Marjorie, 1987).
L’intérêt de la recherche de tels indicateurs réside dans la propriété qu'ils sporulent, ce qui
les rend particulièrement résistants aux traitements de désinfection (Marjorie, 1987).