Chapitre II : Matériel et méthodes
36
- Laisser se solidifier.
- Incuber, l’ensemble ainsi préparé, à 37°C, durant 72 heures.
4.2.2.3. Lecture et dénombrement
Les colonies caractéristiques de la Flore Mésophile Aérobie Totale (FMAT) sur le milieu
gélosé nutritif Plate Count Agar (PCA) sont blanches de forme lenticulaire. La lecture se fait
sur 2 boites ensemencées avec des dilutions successives. L’unité de dénombrement est
l’UFC.g-1 (Ablad, 2010).
Le nombre de germes par gramme (N) de produit est obtenu selon la formule suivante
í µí± =
ΣC
V (n1 + 0, 1 n2) x d
N= nombre de germes par gramme de produit.
ΣC= somme des colonies caractéristiques sur les deux boites retenues.
V= volume de l’inoculum appliqué à chaque boite (en ml).
d= taux de dilution correspondant à la première dilution retenue.
n1= nombre de boite lu à la 1
ère dilution.
4.2.3. Dénombrement des germes de la contamination fécale
4.2.3.1. Dénombrement des coliformes fécaux et E.coli
4.2.3.1.1.
Définitions
Les coliformes totaux
Ce sont des micro-organismes en forme bâtonnets non sporogènes, à Gram négatif, oxydase
négative, capables de croitre en aérobie à 37°C, sur un milieu lactosé (Marjorie, 1987).
Les coliformes fécaux
Ils présentent les mêmes propriétés que les coliformes totaux, vivent dans les intestins de
l’homme et des animaux, ce sont des micro-organismes indicateurs d'une contamination
d'origine fécale récente ou constante. Ils sont thermo-tolérants capables de croitre en aérobie
à 44°C sur un milieu lactosé. L'espèce caractéristique et principale des coliformes fécaux est
Escherichia coli (Marjorie, 1987).
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- Laisser se solidifier.
- Incuber, l’ensemble ainsi préparé, à 37°C, durant 72 heures.
4.2.2.3. Lecture et dénombrement
Les colonies caractéristiques de la Flore Mésophile Aérobie Totale (FMAT) sur le milieu
gélosé nutritif Plate Count Agar (PCA) sont blanches de forme lenticulaire. La lecture se fait
sur 2 boites ensemencées avec des dilutions successives. L’unité de dénombrement est
l’UFC.g-1 (Ablad, 2010).
Le nombre de germes par gramme (N) de produit est obtenu selon la formule suivante
í µí± =
ΣC
V (n1 + 0, 1 n2) x d
N= nombre de germes par gramme de produit.
ΣC= somme des colonies caractéristiques sur les deux boites retenues.
V= volume de l’inoculum appliqué à chaque boite (en ml).
d= taux de dilution correspondant à la première dilution retenue.
n1= nombre de boite lu à la 1
ère dilution.
4.2.3. Dénombrement des germes de la contamination fécale
4.2.3.1. Dénombrement des coliformes fécaux et E.coli
4.2.3.1.1.
Définitions
Les coliformes totaux
Ce sont des micro-organismes en forme bâtonnets non sporogènes, à Gram négatif, oxydase
négative, capables de croitre en aérobie à 37°C, sur un milieu lactosé (Marjorie, 1987).
Les coliformes fécaux
Ils présentent les mêmes propriétés que les coliformes totaux, vivent dans les intestins de
l’homme et des animaux, ce sont des micro-organismes indicateurs d'une contamination
d'origine fécale récente ou constante. Ils sont thermo-tolérants capables de croitre en aérobie
à 44°C sur un milieu lactosé. L'espèce caractéristique et principale des coliformes fécaux est
Escherichia coli (Marjorie, 1987).