Matériels et méthodes
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b. Filtration et dilution du minéralisât
Après refroidissement des matras, on filtre chaque minéralisât dans un erlenmeyer. On lave le
matras et on filtre aussi l’eau de rinçage.
On ajuste à 100ml, avec l’eau distillée.
On transvase les minéralisât dilués et filtrés dans des erlenmeyers colorés en brun, à bouchon,
étiquetés (Figure 5, Annexe 1) et on les conserve au réfrigérateur à 4° C.
c. Distillation
-On prélève dans un matras de Kjeldahl 20 ml du minéralisât filtré et dilué pour la
distillation. Ensuite, on place le matras dans l’appareil de distillation « Behr, Labor-Technik »
(Figure 6, Annexe 1).
-A l’aide d’un bouton on ajoute 40 ml de la soude NaOH à 40% dans le matras et on débute
la distillation.
- On recueille le distillat (ammoniaque entrainé à la vapeur d’eau) dans un erlenmeyer de
collecte, contenant 20ml d’acide borique à 4% dont le pH a été préalablement déterminé.
-On continue la distillation jusqu'à obtenir 100 ml de solution (acide borique + ammoniaque
entrainé à la vapeur d’eau), l’opération dure 5 à 10 min. On relève de nouveau la valeur du pH.
d. Titrage
On ajoute au distillat obtenu, 10 gouttes de la solution d’indicateur « Tashiro », On titre
directement la solution obtenue par une solution d’acide chlorhydrique HCl à 0.2N jusqu'à
l’obtention du pH initial de la solution d’acide borique (Figure 7, Annexe 1).
2.4.1.4. Expression des résultats
Soit : 1ml de HCl 2.803 mg N (azote)
Le taux des protéines est calculé selon l’équation suivante :
% de protéine = X * F =
í µí¿.í µí¿í µí¿í µí¿∗í µí±½∗í µí¿í µí¿í µí¿
í µí¿í µí¿í µí¿∗í µí²
* F
Où : X : quantité d’azote dans 100g de chair.
F : facteur dépendant du type d’aliment analysé = 6.25 (protéine animale).
V : volume d’HCl.
m : le poids de l’échantillon en g.
2.4.2. Dosage des lipides
Les lipides sont insolubles dans l’eau et très solubles dans les solvants organique, tel que l’éther
éthylique. La plupart des méthodes de dosage des lipides exploitent ces propriétés physiques
pour extraire les lipides des aliments dans le but de mesurer leur concentration.
L’extraction des lipides est réalisée par la méthode de Soxhlet.
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b. Filtration et dilution du minéralisât
Après refroidissement des matras, on filtre chaque minéralisât dans un erlenmeyer. On lave le
matras et on filtre aussi l’eau de rinçage.
On ajuste à 100ml, avec l’eau distillée.
On transvase les minéralisât dilués et filtrés dans des erlenmeyers colorés en brun, à bouchon,
étiquetés (Figure 5, Annexe 1) et on les conserve au réfrigérateur à 4° C.
c. Distillation
-On prélève dans un matras de Kjeldahl 20 ml du minéralisât filtré et dilué pour la
distillation. Ensuite, on place le matras dans l’appareil de distillation « Behr, Labor-Technik »
(Figure 6, Annexe 1).
-A l’aide d’un bouton on ajoute 40 ml de la soude NaOH à 40% dans le matras et on débute
la distillation.
- On recueille le distillat (ammoniaque entrainé à la vapeur d’eau) dans un erlenmeyer de
collecte, contenant 20ml d’acide borique à 4% dont le pH a été préalablement déterminé.
-On continue la distillation jusqu'à obtenir 100 ml de solution (acide borique + ammoniaque
entrainé à la vapeur d’eau), l’opération dure 5 à 10 min. On relève de nouveau la valeur du pH.
d. Titrage
On ajoute au distillat obtenu, 10 gouttes de la solution d’indicateur « Tashiro », On titre
directement la solution obtenue par une solution d’acide chlorhydrique HCl à 0.2N jusqu'à
l’obtention du pH initial de la solution d’acide borique (Figure 7, Annexe 1).
2.4.1.4. Expression des résultats
Soit : 1ml de HCl 2.803 mg N (azote)
Le taux des protéines est calculé selon l’équation suivante :
% de protéine = X * F =
í µí¿.í µí¿í µí¿í µí¿∗í µí±½∗í µí¿í µí¿í µí¿
í µí¿í µí¿í µí¿∗í µí²
* F
Où : X : quantité d’azote dans 100g de chair.
F : facteur dépendant du type d’aliment analysé = 6.25 (protéine animale).
V : volume d’HCl.
m : le poids de l’échantillon en g.
2.4.2. Dosage des lipides
Les lipides sont insolubles dans l’eau et très solubles dans les solvants organique, tel que l’éther
éthylique. La plupart des méthodes de dosage des lipides exploitent ces propriétés physiques
pour extraire les lipides des aliments dans le but de mesurer leur concentration.
L’extraction des lipides est réalisée par la méthode de Soxhlet.