Chapitre II
MATERIEL ET METHODES
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b. Procédure
- Ensemencer la colonie suspecte par piqûre centrale à l’aide d’une pipette Pasteur jusqu’au
fond du tube de gélose.
- Incuber 18 à 24 heures à 35-37°C. .
c. Lecture
La fermentation du mannitol provoque un virage au jaune du milieu. Les bactéries mobiles
envahissent tout le milieu à partir de la piqûre centrale. (Figure II.13)
Figure II.13: lecture du test Mannitol mobilité.
4.5.3.5 Test de la catalase
a. Principe
Cette enzyme catalyse la décomposition du peroxyde d’hydrogène (H 2 O 2 ) qui est produit par
certaines réactions cellulaires et qui est très toxiques, donc c’est l’une des enzymes chargée
d’éponger l’eau oxygénée par la dismutation (SINGLETON et SAINSBURY, 1984)
La réaction catalysée est la suivante :
2H 2 O 2  O 2 + 2H 2 O
Le test de la catalase consiste essentiellement à ajouter du peroxyde d’hydrogène à des bactéries
: la présence de catalase donne lieu à l’apparition de bulles d’oxygène.
b. procédure
 Déposer sur une lame propre une goutte d’eau oxygénée;
 Prélever une colonie à l’aide d’une pipete pasteur ;
 Déposer la colonie dans la goutte.
A : Absence d’acidification du milieu La bactérie ne fermente
pas le mannitol « mannitol –».
B : Acidification du milieu révélée par virage de couleur  La
bactérie fermente le mannitol « mannitol+ ».
C : Acidification du milieu et production de gaz bactérie
fermente le mannitol « mannitol + ».
D : Pas de déplacement des bactéries dans le milieu Les
bactéries sont « Mobilité – ».
E : Diffusion des bactéries dans la gélose Les bactéries sont
« Mobilité+ ».