Chapitre 02 :
Matérieles et Méthodes
25
Dans le sédiment :
[Chlorophylle-a] (µg/g) = [26,7 (A665
na - A665
a
)*mh]/ (ms*l)
[Phéopigments] (µg/g) = [26,7 (1,7A665
a - A665
na
)*mh]/ (ms*l)
3.5. Sels nutritifs :
3.5.1 Orthophosphates :
Les Orthophosphates sont dosés par la méthode colorimétrique de Murphy et Riely (1962) sur
50 ml d’échantillon. Les Orthophosphates réagissent avec le molybdate d’ammonium en
milieu acide pour former un complexe jaune, le phosphomolybdate d’ammonium ; par
réduction de ce complexe à l’aide d’acide ascorbique on obtient une coloration bleue qui se
développe rapidement grâce à l’antimoine.
3.5.2 Nitrites :
La concentration en nitrite est mesurée selon une méthode colorimétrique basée sur la réaction
de Griess optimisée en 1952 par Bendschneider et Ronbinson. La diazotation de la
sulfanilamide en milieu acide et sa réaction avec la N-(1-naphtyl)-éthylènediamine donne un
complexe coloré pourpre susceptible d’un dosage spectrophotométrique.
3.5.3. Nitrates :
Les Nitrates sont réduits en Nitrites sur une colonne de cadmium-cuivre Wood et al. (1967) et
l’ensemble est dosé par colorimétrie après diazotation avec la sulfanilamide et copulation du
diazoïque obtenu selon la méthode décrite par Bendshneider et Robinson (1952).
3.5.4. Ammonium :
L’Ammonium est dosé par la méthode de Koroleff (1969). En milieu alcalin (8 ˂ pH ˂ 11,5),
l’ammoniac dissous réagit sur l’hypochlorite pour former une monochloramine. Ce composé
en présence de phénol et en milieu oxydant donne lieu à la formation de bleu d’indophénol.
3.5.5. Silicates :
Le principe est basé sur la méthode de Mullin et Riley (1955). Les silicates réagissent en milieu acide
(1 ˂ pH ˂ 2) avec le molybdate d’ammonium pour former un hétéroplyannion. Ce complexe est
ensuite réduit en bleu de molybdène par une solution de métol et de sulfite de sodium. Les
interférences avec les ortophosphates et les arséniates dissous dans l’eau du lac sont éliminées en
opérant à pH convenable et en ajoutant de l’acide oxalique qui décompose les phospho et
arséniomolybdates éventuellement formés, la réaction est accélérer sous l’effet de la température.
3.5.6. Calcul et expression des résultats :
- Les absorbances
Atr : Absorbance mesurée pour l’échantillon traite (après correction du blanc des cuves).
bt : Absorbance mesurée pour la turbidité (après correction des blancs des cuves).
br : Absorbance mesurée pour le blanc des réactifs (après correction des blancs des cuves).
Matérieles et Méthodes
25
Dans le sédiment :
[Chlorophylle-a] (µg/g) = [26,7 (A665
na - A665
a
)*mh]/ (ms*l)
[Phéopigments] (µg/g) = [26,7 (1,7A665
a - A665
na
)*mh]/ (ms*l)
3.5. Sels nutritifs :
3.5.1 Orthophosphates :
Les Orthophosphates sont dosés par la méthode colorimétrique de Murphy et Riely (1962) sur
50 ml d’échantillon. Les Orthophosphates réagissent avec le molybdate d’ammonium en
milieu acide pour former un complexe jaune, le phosphomolybdate d’ammonium ; par
réduction de ce complexe à l’aide d’acide ascorbique on obtient une coloration bleue qui se
développe rapidement grâce à l’antimoine.
3.5.2 Nitrites :
La concentration en nitrite est mesurée selon une méthode colorimétrique basée sur la réaction
de Griess optimisée en 1952 par Bendschneider et Ronbinson. La diazotation de la
sulfanilamide en milieu acide et sa réaction avec la N-(1-naphtyl)-éthylènediamine donne un
complexe coloré pourpre susceptible d’un dosage spectrophotométrique.
3.5.3. Nitrates :
Les Nitrates sont réduits en Nitrites sur une colonne de cadmium-cuivre Wood et al. (1967) et
l’ensemble est dosé par colorimétrie après diazotation avec la sulfanilamide et copulation du
diazoïque obtenu selon la méthode décrite par Bendshneider et Robinson (1952).
3.5.4. Ammonium :
L’Ammonium est dosé par la méthode de Koroleff (1969). En milieu alcalin (8 ˂ pH ˂ 11,5),
l’ammoniac dissous réagit sur l’hypochlorite pour former une monochloramine. Ce composé
en présence de phénol et en milieu oxydant donne lieu à la formation de bleu d’indophénol.
3.5.5. Silicates :
Le principe est basé sur la méthode de Mullin et Riley (1955). Les silicates réagissent en milieu acide
(1 ˂ pH ˂ 2) avec le molybdate d’ammonium pour former un hétéroplyannion. Ce complexe est
ensuite réduit en bleu de molybdène par une solution de métol et de sulfite de sodium. Les
interférences avec les ortophosphates et les arséniates dissous dans l’eau du lac sont éliminées en
opérant à pH convenable et en ajoutant de l’acide oxalique qui décompose les phospho et
arséniomolybdates éventuellement formés, la réaction est accélérer sous l’effet de la température.
3.5.6. Calcul et expression des résultats :
- Les absorbances
Atr : Absorbance mesurée pour l’échantillon traite (après correction du blanc des cuves).
bt : Absorbance mesurée pour la turbidité (après correction des blancs des cuves).
br : Absorbance mesurée pour le blanc des réactifs (après correction des blancs des cuves).