Chapitre 02 :
Matérieles et Méthodes
23
La matière inorganique particulaire (MIP) de chaque prélèvement est obtenue à partir de
l’équation :
í²
⁄ ⁄ = í±º − −−−
3.4. Chlorophylle-a et Phéopigments :
Les mesures de concentrations des pigments photosynthétiques sont des paramètres
importants pour l’étude de la production primaire dans les eaux douces et les océans. Parmi
l’ensemble des pigments phytoplanctoniques reconnus, la chlorophylle a (Chl-a), commune à
tous les organismes photooxygéniques, est particulièrement étudiée, car il est la plus
abondante et joue un rôle clé dans le processus de la photosynthèse. Ainsi, la concentration en
termes de chlorophylle est certainement l’indicateur de biomasse phytoplanctonique le plus
utilisé en océanographie. Il permet de définir la fertilité d’un milieu et de calculer l’index de
productivité ou l’efficacité photosynthétique des organismes en présence (Raimbault et al.,
2004).
Dans notre cas on a utilisé la méthode monochromatique de LORENZEN (1967).
Après filtration d’un certain volume d’eau de mer pour concentre le matériel particulaire, le
filtre est immergél’absorbance de l’extrait a une ou plusieurs longueur d’onde avant et après
acidification si l’on recherche également les formes dégradées (Aminot et Chaussepied
,1983).
Matériels et appareillages :
- Dispositif de filtration et des filtres GF/F 0,7 μm de porosité.
- Tubes de dosage de 10 ml,
- Centrifugeuse Sigma
- Spectrophotomètre ultraviolet a doublé faisceaux de type UV-1800, SHIMADZU.
- Matériels courant de laboratoire.
Réactifs :
- Suspension carbonate de magnésium MgCO3 à 1%.
- Solvant d’extraction : l’acétone 90%.
Mode opératoire :
a) Filtration et conservation :
- Dès le retour au laboratoire on a fait la filtration de chaque échantillon et on ajoute quelques
gouttes de MgCO3 sur le filtre.
- Le filtre est plié en quatre et enrobé dans du papier aluminium préalablement étiqueté.
- Mettre les filtres dans le congélateur pour une analyse ultérieure.
b) Extraction des pigments :
On enveloppe les tubes dans une feuille d’aluminium.
- Introduire le filtre dans un tube à centrifuger et ajouter 10 ml d’acétone 90%
- Déchiqueter le filtre à l’aide d’une baguette ou d’un tube de verre, boucher et agiter pour
disperser les fibres.
- Laisser l’extraction se poursuivre 24h au réfrigérateur dans l’acétone.
Matérieles et Méthodes
23
La matière inorganique particulaire (MIP) de chaque prélèvement est obtenue à partir de
l’équation :
í²
⁄ ⁄ = í±º − −−−
3.4. Chlorophylle-a et Phéopigments :
Les mesures de concentrations des pigments photosynthétiques sont des paramètres
importants pour l’étude de la production primaire dans les eaux douces et les océans. Parmi
l’ensemble des pigments phytoplanctoniques reconnus, la chlorophylle a (Chl-a), commune à
tous les organismes photooxygéniques, est particulièrement étudiée, car il est la plus
abondante et joue un rôle clé dans le processus de la photosynthèse. Ainsi, la concentration en
termes de chlorophylle est certainement l’indicateur de biomasse phytoplanctonique le plus
utilisé en océanographie. Il permet de définir la fertilité d’un milieu et de calculer l’index de
productivité ou l’efficacité photosynthétique des organismes en présence (Raimbault et al.,
2004).
Dans notre cas on a utilisé la méthode monochromatique de LORENZEN (1967).
Après filtration d’un certain volume d’eau de mer pour concentre le matériel particulaire, le
filtre est immergél’absorbance de l’extrait a une ou plusieurs longueur d’onde avant et après
acidification si l’on recherche également les formes dégradées (Aminot et Chaussepied
,1983).
Matériels et appareillages :
- Dispositif de filtration et des filtres GF/F 0,7 μm de porosité.
- Tubes de dosage de 10 ml,
- Centrifugeuse Sigma
- Spectrophotomètre ultraviolet a doublé faisceaux de type UV-1800, SHIMADZU.
- Matériels courant de laboratoire.
Réactifs :
- Suspension carbonate de magnésium MgCO3 à 1%.
- Solvant d’extraction : l’acétone 90%.
Mode opératoire :
a) Filtration et conservation :
- Dès le retour au laboratoire on a fait la filtration de chaque échantillon et on ajoute quelques
gouttes de MgCO3 sur le filtre.
- Le filtre est plié en quatre et enrobé dans du papier aluminium préalablement étiqueté.
- Mettre les filtres dans le congélateur pour une analyse ultérieure.
b) Extraction des pigments :
On enveloppe les tubes dans une feuille d’aluminium.
- Introduire le filtre dans un tube à centrifuger et ajouter 10 ml d’acétone 90%
- Déchiqueter le filtre à l’aide d’une baguette ou d’un tube de verre, boucher et agiter pour
disperser les fibres.
- Laisser l’extraction se poursuivre 24h au réfrigérateur dans l’acétone.