Chapitre II : Matériel et méthodes 2018
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 ajouter une pincée de Sulfate de Sodium (Na2SO4) pour déshydrater le mélange (fraction organique
dissous dans l’hexane) ;
 éliminer l’hexane, en utilisant premièrement le Rotavapor pour concentrer l’échantillon jusqu’à
l’obtention d’un volume de 10 ml, puis, on procède à une deuxième concentration sous jet d’azote qui
permet la compensation de l’échantillon et l’évaporation de l’hexane.
Cette étape nous permet de récupérer 5ml d’échantillon.
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ème étape : séparation et lecture des hydrocarbures aliphatiques des hydrocarbures aromatiques
Cette séparation est réalisée à l’aide d’une colonne Chromatographique à ciel ouvert:
À l’intérieur d’une burette de 25 ml contenant de la laine de verre est introduit;
- 5 g du gel de silice qui permet le fractionnement ;
- 5 g de l’Alumine qui permet la purification ;
- une pincé de Na2SO4 et de l’hexane (juste assez pour mouiller les réactifs) ;
Verser l’échantillon (5ml) et 20 ml d’hexane, la première fraction (F1 : fraction aliphatique) est récupérer par
décantation puis, la seconde (F2 : fraction aromatique) est récupérée (toujours par décantation) après ajout
de 20 ml (70 :30) de mélange hexane-dichlorométhane
Principe du spéctro-fluoresçant ultra violet (S.F.U.V)
Cette technique repose sur la propriété de certaines molécules, La SFUV mesure l’émission de fluorescence
des molécules soumises à un rayonnement d’excitation ultraviolet et l’intensité de fluorescence est
proportionnelle à la concentration des HPA. (Marchand, 1983)
b- Mesure et mode de calcul
La mesure se fait en plaçant une fraction de l’extrait purifié dans une cuve en quartz de 1 cm de trajet
optique.les concentrations des HPA dans les extraits sont déterminées à partir de droits d’étalonnages après
évaluation de la cotangent 𝛼
Ampoule de décantation
Rotavapor
Concentration sous jet d’azote
Figure 10. Matériels utilisés pour la mesure des hydrocarbures.