ІІ. Matériel et méthodes
30
b-Technique
 A partir d’une culture jeune (18-24h), préparer dans 5ml d’eau physiologique stérile
une suspension bactérienne de 0.5McFarland (10
8 cellules /ml),
 Ajuster l’inoculum à 10
7 cellules/ml.
 Plonger un écouvillon stérile dans la suspension bactérienne de 10
7 cellules/ml.
 Ensemencer la boite en frottant l’écouvillon sur la totalité de la surface gélosé et en
tournant la boite trois fois de 60° afin d’assurer une bonne distribution de l’inoculum.
 Appliquer les disques d’antibiotiques (Tableau 2) à l’aide d’une pince stérile selon le
schéma de la Figure (18)
 Laisser diffuser pendant 15m minutes, à température ambiante,
 Incuber à 37C° pendant 18-24h.
Tableau 2: Les différents antibiotiques en disque utilisés pour l’antibiogramme.
Famille
Antibiotique
Charge (μg)
Abréviation
Bétalactames
Ampicilline
10
AM
Aztréonam
30
ATM
Céfalexine
(Céphalosposrines de 1
ème
génération)
30
CN
Céfoxitine
(Céphalosposrines de 2
ème
génération)
30
FOX
Ceftazidime
(Céphalosposrines de 3
ème
génération)
30
CAZ
Cefotaxime(Céphalosposrines
de 3
ème génération)
30
CTX
Tétracyclines
Tétracycline
30 UI
TE
Sulfamides
Triméthoprime
5
TMP
Triméthoprime/Sulfamethxazol
1.25/23.75
SXT
Quinolones
Acide nalidixique
30
NA
Aminosides
Amikacine
30
AK