Chapitre III
Matériels et Méthodes
32
Il est donc nécessaire de posséder des solutions étalons dont le pH est connu avec précision
(étalons définis par le national bureau of standards, NBS), mais les NBS ont une faible force
ionique alors que l’eau de mer a une forte force ionique ≈0,7 ce qui introduit une erreur
systématique sur le pH donc nous sommes obligés à utiliser des étalons secondaires à force
ionique identique à celle des échantillons pour améliorer la précision et la reproductibilité des
mesures
III.3.3.1.Préparation des tampons
Le tampon préparé est le TRIS à base d’eau de mer artificielle avec une salinité de 35g /kg
décrit par Dickson (1994) (Voir annexe 2)
Le pH de ce tampon est fonction de la température et la salinité de ce tampon. Ce pH est
calculé par la formule proposée par Dickson (1994) :
( )
(
)
(14)
pH(s) : pH du TRIS préparé.
S : salinité en g/kg du tampon.
T : température en degré Kelvin.
III.3.3.2.Étalonnage de pH-mètre
L’étalonnage de pH-mètre se fait avant chaque série de dosage en deux étapes, un étalonnage
par des tampons à pH=4 et pH =7. Ensuite on plonge immédiatement l’électrode dans le TRIS
et on note la valeur mesurée de pH, la température ainsi que la différence de potentiel pour la
correction des valeurs de pH des échantillons. Il est nécessaire que les tampons TRIS et les
échantillons soient à la même température (la température doit rester constante pendant les
mesures pour que la loi de Nernst soit respectée et que la pente soit constante car elle dépend de la
température). Comme nous ne disposions pas de bain thermostaté, dans le cas où les
températures des échantillons sont supérieures à celle de TRIS nous avons utilisés la glace (ice
box) pour abaisser la température et dans le cas opposé nous avons chauffés les flacons avec la
chaleur de nos mains.
III.3.3.3.Mesure des valeurs de pH
Les mesures de pH sont faites au bord du navire océanique M.S. BEN YAHIA avec un pHmètre d’une précision de 0.001 unité de pH qui est muni d’une électrode en verre et une sonde
de température intégrée.
Les mesures sont faites directement en plongeant l’électrode dans Les flacons remplis de l’eau
de mer prélevée pour les mesures de pH. Parfois, il faut attendre quelque minute pour la
stabilisation du pH. Entre deux mesures de pH sur l’eau de mer, il n’est pas nécessaire de
rincer l’éléctrode.il est en revanche important de mesurer le pH des échantillons les moins
salés vers les plus salés.
Matériels et Méthodes
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Il est donc nécessaire de posséder des solutions étalons dont le pH est connu avec précision
(étalons définis par le national bureau of standards, NBS), mais les NBS ont une faible force
ionique alors que l’eau de mer a une forte force ionique ≈0,7 ce qui introduit une erreur
systématique sur le pH donc nous sommes obligés à utiliser des étalons secondaires à force
ionique identique à celle des échantillons pour améliorer la précision et la reproductibilité des
mesures
III.3.3.1.Préparation des tampons
Le tampon préparé est le TRIS à base d’eau de mer artificielle avec une salinité de 35g /kg
décrit par Dickson (1994) (Voir annexe 2)
Le pH de ce tampon est fonction de la température et la salinité de ce tampon. Ce pH est
calculé par la formule proposée par Dickson (1994) :
( )
(
)
(14)
pH(s) : pH du TRIS préparé.
S : salinité en g/kg du tampon.
T : température en degré Kelvin.
III.3.3.2.Étalonnage de pH-mètre
L’étalonnage de pH-mètre se fait avant chaque série de dosage en deux étapes, un étalonnage
par des tampons à pH=4 et pH =7. Ensuite on plonge immédiatement l’électrode dans le TRIS
et on note la valeur mesurée de pH, la température ainsi que la différence de potentiel pour la
correction des valeurs de pH des échantillons. Il est nécessaire que les tampons TRIS et les
échantillons soient à la même température (la température doit rester constante pendant les
mesures pour que la loi de Nernst soit respectée et que la pente soit constante car elle dépend de la
température). Comme nous ne disposions pas de bain thermostaté, dans le cas où les
températures des échantillons sont supérieures à celle de TRIS nous avons utilisés la glace (ice
box) pour abaisser la température et dans le cas opposé nous avons chauffés les flacons avec la
chaleur de nos mains.
III.3.3.3.Mesure des valeurs de pH
Les mesures de pH sont faites au bord du navire océanique M.S. BEN YAHIA avec un pHmètre d’une précision de 0.001 unité de pH qui est muni d’une électrode en verre et une sonde
de température intégrée.
Les mesures sont faites directement en plongeant l’électrode dans Les flacons remplis de l’eau
de mer prélevée pour les mesures de pH. Parfois, il faut attendre quelque minute pour la
stabilisation du pH. Entre deux mesures de pH sur l’eau de mer, il n’est pas nécessaire de
rincer l’éléctrode.il est en revanche important de mesurer le pH des échantillons les moins
salés vers les plus salés.