MATERIEL ET METHODES
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est liée par corrélation à la DBO en fonction du volume de l’échantillon. La lecture est faite
après cinq jours d’incubation (Rodier et al., 2009).
IV.1.6. Matières en suspension (MES)
La méthode consiste à faire passer de l’eau à travers un filtre afin de retenir toutes les
particules de taille supérieure à 0,45 μm. Le filtre est séché et pesé avant et après filtration
sous faible pression. La différence de poids entre les deux pesées permet de connaître la
masse sèche totale de MES dans le volume d’eau correspondant (Aminot et Chaussepied,
1983).
Le dispositif de filtration est composé d’un erlenmayer, d’un support filtre, d’un entonnoir
gradué et d’une pompe à vide. Pour chaque station, on a filtré un volume de 100 ml d’eau de
mer à travers un filtre Wattman de porosité 0,45µm. Le poids des matières retenues est
déterminé par la pesée différentielle du filtre avant et après passage à l’étuve à 105°C pendant 2
heures (Rodier et al., 2009).
IV.2. Analyse microbiologique par filtration sur membrane
La qualité microbiologique de l’eau a été évaluée par l’estimation de la flore totale, des
coliformes totaux et des coliformes thermotolérants. Cette méthode consiste à la filtration de
100 ml de l’échantillon ou de ses dilutions sur une membrane en ester de cellulose, de
porosité 0,45 μm, placée dans une rampe de filtration en inox de six postes dans des
conditions stériles (Rodier et al., 2009). La membrane est déposée à la surface d’un milieu de
culture choisi selon la recherche.
Technique
Dans des conditions stériles, la membrane est déposée sur la plaque poreuse. Un volume de
100 ml d’échantillon agité soigneusement est filtré. Après filtration, la membrane est déposée
à la surface d’une gélose de Mueller Hinton pour la recherche de la flore totale et à la surface
d’une gélose au Tergitol pour la recherche des coliformes totaux et thermotolérants.
L’incubation du milieu est effectuée à 35±2°C pendant 24-48h pour la flore totale et les
coliformes totaux, alors pour les coliformes thermotolérants, elle est effectuée à 44°C.
IV.3. Prévalence de la résistance aux antibiotiques
L’évaluation de la résistance à six molécules de béta-lactamines a été réalisée pour la flore
totale et les coliformes totaux. Après filtration de 100 ml d’échantillon ou de ses dilutions, les
membranes ont été déposées sur gélose Mueller Hinton (flore totale) ou au Tergitol
(coliformes) additionné de l’un des antibiotiques suivants : amoxicilline (AMX), ticarcilline
(TIC), céfoxitine (FOX), céfotaxime (CTX), ceftazidime (CAZ) et imipénème (IMP) à des
concentrations de 32, 64, 64, 64, 64 et 16μg/ml, respectivement.
La prévalence de la résistance aux antibiotiques vis-à-vis de ces six béta-lactamines a été
déterminée par le rapport du nombre de bactéries résistantes obtenues sur gélose au Tergitol et
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est liée par corrélation à la DBO en fonction du volume de l’échantillon. La lecture est faite
après cinq jours d’incubation (Rodier et al., 2009).
IV.1.6. Matières en suspension (MES)
La méthode consiste à faire passer de l’eau à travers un filtre afin de retenir toutes les
particules de taille supérieure à 0,45 μm. Le filtre est séché et pesé avant et après filtration
sous faible pression. La différence de poids entre les deux pesées permet de connaître la
masse sèche totale de MES dans le volume d’eau correspondant (Aminot et Chaussepied,
1983).
Le dispositif de filtration est composé d’un erlenmayer, d’un support filtre, d’un entonnoir
gradué et d’une pompe à vide. Pour chaque station, on a filtré un volume de 100 ml d’eau de
mer à travers un filtre Wattman de porosité 0,45µm. Le poids des matières retenues est
déterminé par la pesée différentielle du filtre avant et après passage à l’étuve à 105°C pendant 2
heures (Rodier et al., 2009).
IV.2. Analyse microbiologique par filtration sur membrane
La qualité microbiologique de l’eau a été évaluée par l’estimation de la flore totale, des
coliformes totaux et des coliformes thermotolérants. Cette méthode consiste à la filtration de
100 ml de l’échantillon ou de ses dilutions sur une membrane en ester de cellulose, de
porosité 0,45 μm, placée dans une rampe de filtration en inox de six postes dans des
conditions stériles (Rodier et al., 2009). La membrane est déposée à la surface d’un milieu de
culture choisi selon la recherche.
Technique
Dans des conditions stériles, la membrane est déposée sur la plaque poreuse. Un volume de
100 ml d’échantillon agité soigneusement est filtré. Après filtration, la membrane est déposée
à la surface d’une gélose de Mueller Hinton pour la recherche de la flore totale et à la surface
d’une gélose au Tergitol pour la recherche des coliformes totaux et thermotolérants.
L’incubation du milieu est effectuée à 35±2°C pendant 24-48h pour la flore totale et les
coliformes totaux, alors pour les coliformes thermotolérants, elle est effectuée à 44°C.
IV.3. Prévalence de la résistance aux antibiotiques
L’évaluation de la résistance à six molécules de béta-lactamines a été réalisée pour la flore
totale et les coliformes totaux. Après filtration de 100 ml d’échantillon ou de ses dilutions, les
membranes ont été déposées sur gélose Mueller Hinton (flore totale) ou au Tergitol
(coliformes) additionné de l’un des antibiotiques suivants : amoxicilline (AMX), ticarcilline
(TIC), céfoxitine (FOX), céfotaxime (CTX), ceftazidime (CAZ) et imipénème (IMP) à des
concentrations de 32, 64, 64, 64, 64 et 16μg/ml, respectivement.
La prévalence de la résistance aux antibiotiques vis-à-vis de ces six béta-lactamines a été
déterminée par le rapport du nombre de bactéries résistantes obtenues sur gélose au Tergitol et