Chapitre II
Matériels et méthodes
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5.3. Recherche des Salmonelles :
Le nombre de Salmonella étant général faible dans un produit, il est nécessaire de procéder à
un pré-enrichissement et un enrichissement dans un milieu sélectif.
L’isolement des Salmonelles est ensuite réalisé sur un milieu sélectif classique (Hektoen) et
les colonies suspectes sont identifiées par les techniques classiques jusqu’à l’identification
immunologique (sérotypage et sérogroupage), (JOFFIN, 2010).
1ere étape : pré-enrichissement
Ajouter 100 ml d’échantillon à 100ml d’eau peptonée tamponnée (EPT), puis incuber à 37°C
pendant 18à 24h.
2eme étape : enrichissement
On prélève 3 à 5 gouttes des flacons présentant un résultat positif (changement de couleur)
dans un tube de bouillon au sélénite-cystine (SFB) double concentration additionné de 2
disques de l’additif SFB puis incuber à 37°C pendant 16 à 18h.
3eme étape : isolement
A partir des milieux d’enrichissement (SFB double concentration), un isolement sur une
gélose d’Hecktoen est réalisé à partir les tubes présentant un résultat positif. Les Salmonelles
ne sont des fermentateurs de lactose ni de saccharose, ils vont apparaitre sous forme de
colonies bleu vert avec ou sans centre noir.