Chapitre III
Matériel et méthodes
42
I.6.3.5. Purification et fractionnement
I.6.3.5.1. Traitement au mercure
Afin d’éliminer les produits soufrés qui présentent en grande proportion dans les sédiments
soumis à des apports anthropique, deux goutes de mercure sont ajoutées dans chaque extrait
d’échantillon suivi de l’agitation du tube pendant 3 mn. Le mercure en piégeant les composés
soufrés noirci.
Cette étape est primordiale lors de l’analyse des hydrocarbures par chromatographie en phase
gazeuse (CPG) parce que les composés soufrés interfèrent lors de l’analyse.
I.6.3.5.2. Purification et fractionnement
La phase de purification est réalisée par chromatographie liquide sur colonne ouverte en
utilisant le gel de silice / alumine pour se débarrasser des lipides co-extrait avec les
hydrocarbures. Elle se fait comme pour les hydrocarbures dissous/dispersé (page).
I.7. Analyse quantitative des hydrocarbures aromatique
I.7.1. Spectrofluorimétrie UV (SFUV)
La spectrofluorimétrie ultra violet UV, est une technique de mesure quantitative des
hydrocarbures aromatiques appliquée par Levy (1977) et préconisée par la Commission
Océanographique Intergouvernementale de l’UNESCO (1977) pour la surveillance de la
pollution marine par les hydrocarbures. Les teneurs mesurées ne représentent pas réellement
les concentrations absolues d’hydrocarbures. Cependant, la réponse de fluorescence fournit un
excellent indice de pollution pétrolière, du fait de très faibles teneurs des hydrocarbures
aromatiques biogènes dans le milieu marin. La limite de détection est de l’ordre de 0,1µg/l
pour l’eau de mer (CNEXO, 1983).
I.7.1.1. Principe de la méthode
Cette repose sur la propriété de certaines molécules, en l’occurrence les hydrocarbures
aromatique, d’émettre, après excitation par un rayonnement ultraviolet à une longueur d’onde
spécifique, un rayonnement à une longueur d’onde supérieure, dans le visible.
La SFUV mesure l’émission de fluorescence des molécules soumises à un rayonnement
d’excitation ultraviolet et l’intensité de fluorescence est proportionnelle à la concentration des
HPA. Cette relation de proportionnalité est interprétée une droite du frome (équation 1):
Y = AX + B ……………. (1)
Y= intensité de fluorescence (UA : Unité Arbitraire).
Matériel et méthodes
42
I.6.3.5. Purification et fractionnement
I.6.3.5.1. Traitement au mercure
Afin d’éliminer les produits soufrés qui présentent en grande proportion dans les sédiments
soumis à des apports anthropique, deux goutes de mercure sont ajoutées dans chaque extrait
d’échantillon suivi de l’agitation du tube pendant 3 mn. Le mercure en piégeant les composés
soufrés noirci.
Cette étape est primordiale lors de l’analyse des hydrocarbures par chromatographie en phase
gazeuse (CPG) parce que les composés soufrés interfèrent lors de l’analyse.
I.6.3.5.2. Purification et fractionnement
La phase de purification est réalisée par chromatographie liquide sur colonne ouverte en
utilisant le gel de silice / alumine pour se débarrasser des lipides co-extrait avec les
hydrocarbures. Elle se fait comme pour les hydrocarbures dissous/dispersé (page).
I.7. Analyse quantitative des hydrocarbures aromatique
I.7.1. Spectrofluorimétrie UV (SFUV)
La spectrofluorimétrie ultra violet UV, est une technique de mesure quantitative des
hydrocarbures aromatiques appliquée par Levy (1977) et préconisée par la Commission
Océanographique Intergouvernementale de l’UNESCO (1977) pour la surveillance de la
pollution marine par les hydrocarbures. Les teneurs mesurées ne représentent pas réellement
les concentrations absolues d’hydrocarbures. Cependant, la réponse de fluorescence fournit un
excellent indice de pollution pétrolière, du fait de très faibles teneurs des hydrocarbures
aromatiques biogènes dans le milieu marin. La limite de détection est de l’ordre de 0,1µg/l
pour l’eau de mer (CNEXO, 1983).
I.7.1.1. Principe de la méthode
Cette repose sur la propriété de certaines molécules, en l’occurrence les hydrocarbures
aromatique, d’émettre, après excitation par un rayonnement ultraviolet à une longueur d’onde
spécifique, un rayonnement à une longueur d’onde supérieure, dans le visible.
La SFUV mesure l’émission de fluorescence des molécules soumises à un rayonnement
d’excitation ultraviolet et l’intensité de fluorescence est proportionnelle à la concentration des
HPA. Cette relation de proportionnalité est interprétée une droite du frome (équation 1):
Y = AX + B ……………. (1)
Y= intensité de fluorescence (UA : Unité Arbitraire).