Partie 02
Zone d’étude et Méthodologie
-22 Matériel :
- Dispositif de filtration de marque « Sartorius stedim » (figure18).
- Bec-Bunsen pour garder tout au long de la manipulation la zone de travail stérile ;
- Boites de Pétri avec les milieux de culture spécifiques pour chaque germe ;
- Membranes d’ester de cellulose, filtrantes, quadrillées et stériles (en emballage individuel)
de porosité de 0.45μm et de 47 mm de diamètre susceptibles de retenir les bactéries ;
- Deux Incubateurs (Etuves) ;
- Pompe à vide ;
- Pinces stérilisées et Pipettes.
Figure 18 : Dispositif de l’appareil de filtration sur membrane.
 Mode opératoire
- Stériliser le dispositif de filtration ;
- Mettre en place le dispositif ;
- Mettre le filtre sur la grille ;
- Filtrer un volume d’échantillon (100ml) ;
- Déposer le filtre sur le milieu de culture adapté pour chaque bactérie recherchée;
- Incuber les boites à la température adéquate.
2.4.1. Dénombrement des coliformes totaux et Coliformes thermotolérants «Fécaux»
Cette méthode conduit à un dénombrement présomptif des coliformes totaux et des
coliformes fécaux. Le nombre de colonies trouvées est exprimé en Unité Formant Colonie
dans 100 ml d’eau filtrée (UFC/100ml). La flore bactérienne associée est généralement
beaucoup moins abondante dans la boîte incubée à 44°C (figure 19).