Chapitre II
Matériels et méthodes
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Pour la méthode indirecte, un spectrophotomètre (JENWAY 6405. UV/VIS) (figure 11) a
été utilisé.
Le spectrophotomètre mesure la chlorophylle a et mesure la pénétration de radiation d’une
langur d’onde de 540 nm, à travers l’échantillon continu dans une cuve de quartz. Pour
établir une correspondance entre la densité optique et la concentration cellulaire.
Figure 11.Spectrophotomètre (JENWAY 6405. UV/VIS)
2.8. Comptage cellulaire
Différente cellules de comptage de profondeur connu et dont le quadrillage défini donne
un volume déterminé, peuvent être utilisées (voir annexe 03 tableau).
Pour cette étude le comptage de cellules phytoplanctonique été effectué avec la cellule
malassez (voir Annexe 04)
2.8.1. Mode opératoires
La méthode de comptage cellulaire sous microscope droit à l’aide d’une cellule de Malassez
s’est effectuée périodiquement, une goutte de la culture algale est prélevée à l’aide d’une
pipette pasteur, stérilisée puis déposée sur la cellule de Mallassez. Les espèces mobiles sont
fixées au préalable par une goutte de formol 10% à une dose de 2 à 3 gouttes pour 20 ml de
culture, cette préparation n’est pas nécessaire pour les algues statiques (diatomées). Une
lamelle est déposée sur l’ensemble en évitant la formation des bulles d’air.
2.8.2. Technique de comptage
Une première observation au microscope a été effectuée à l’objectif (X100) pour la mise au
point des cadres, mais le comptage a été effectué a grossissement (X40). À l'aide d'un
compteur, le nombre de cellule par case est déterminé ce dernier est converti au nombre
moyen de cellules par unité de volume. Le détaille de technique est démontré en annexe 04.
Matériels et méthodes
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Pour la méthode indirecte, un spectrophotomètre (JENWAY 6405. UV/VIS) (figure 11) a
été utilisé.
Le spectrophotomètre mesure la chlorophylle a et mesure la pénétration de radiation d’une
langur d’onde de 540 nm, à travers l’échantillon continu dans une cuve de quartz. Pour
établir une correspondance entre la densité optique et la concentration cellulaire.
Figure 11.Spectrophotomètre (JENWAY 6405. UV/VIS)
2.8. Comptage cellulaire
Différente cellules de comptage de profondeur connu et dont le quadrillage défini donne
un volume déterminé, peuvent être utilisées (voir annexe 03 tableau).
Pour cette étude le comptage de cellules phytoplanctonique été effectué avec la cellule
malassez (voir Annexe 04)
2.8.1. Mode opératoires
La méthode de comptage cellulaire sous microscope droit à l’aide d’une cellule de Malassez
s’est effectuée périodiquement, une goutte de la culture algale est prélevée à l’aide d’une
pipette pasteur, stérilisée puis déposée sur la cellule de Mallassez. Les espèces mobiles sont
fixées au préalable par une goutte de formol 10% à une dose de 2 à 3 gouttes pour 20 ml de
culture, cette préparation n’est pas nécessaire pour les algues statiques (diatomées). Une
lamelle est déposée sur l’ensemble en évitant la formation des bulles d’air.
2.8.2. Technique de comptage
Une première observation au microscope a été effectuée à l’objectif (X100) pour la mise au
point des cadres, mais le comptage a été effectué a grossissement (X40). À l'aide d'un
compteur, le nombre de cellule par case est déterminé ce dernier est converti au nombre
moyen de cellules par unité de volume. Le détaille de technique est démontré en annexe 04.