Chapitre 3
Matériel et Méthodes
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V.2. 3. Principe du dosage des Orthophosphates (PO 4
3- )
Sa méthode d’analyse est la colorimétrie du bleu phosphomolybdique, qui est basée sur la
réaction de Deniges (1920) selon la méthode de Murphy & Reily (1962) (in Aminot et
Kérouel, 2004). Cette méthode est utilisée et appliquée à l'eau de mer avec une concentration
en orthophosphates allant de 2 à 100 ppb. Le molybdate d'ammonium et le tartrate
d'antimoine de potassium réagissent à une température de 40°C (bain marie) dans un médium
acide avec les solutions diluées du phosphate pour former un composé d'antimoine-phosphomolybdate. Ce composé est réduit à un composé intensément bleu-coloré par l'acide
ascorbique à un maximum d’absorption à 880 nm.
a) Réactifs et standards du dosage des phosphates (PO 4
3- ) (Partie III, annexe 5).
b) Mode opératoire
 L'appareil doit être allumé une demi-heure à une heure avant l'analyse pour la stabilité
de l'énergie ;
 La cuve de mesure dans le trajet optique est de 50 mm ;
 Le filtre monochromatique est à 880 nm ;
 La sensibilité du standard le plus élevé 100 ppb P est à ±150 A.U ;
 Le temps d'échantillonnage est 60 secondes ;
 Le temps de rinçage est de 60 secondes ;
 Le temps de stabilisation du système hydraulique est de l'ordre de 20 minutes.
c) Etalonnage
Une série de six standards est préparé à chaque analyse (quotidiennement). La courbe
d'étalonnage établit a pour équation y = 4298x avec R² = 0,999 (Figure 3.19).
Figure 3.19 : Courbe d'étalonnage des phosphates
y = 4298,x
R² = 0,999
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
3500
4000
0
0
0
1
1
1
Hauteur
du
pic
Phosphates (umol/l)