Chapitre 3 : Matériels et méthodes
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l’absorbance de l’extrait a une ou plusieurs longueur d’onde avant et après acidification si l’on
recherche également les formes dégradées (Aminot et Chausse-pied ,1983).
2.3.2. Matériels et appareillages
- Dispositif de filtration et des filtres GF/F 0,7 μm de porosité.
- Tubes de dosage de 10ml,
- Centrifugeuse Sigma (Figure 3.8, annexe2).
- Spectrophotomètre ultraviolet a double faisceaux de type UV-1800, SHIMADZU
(Figure 3.9, annexe2).
- Matériels courant de laboratoire.
2.3.3 Réactifs
- Suspension carbonate de magnésium MgCO3 à 1%.
- Solvant d’extraction : l’acétone 90%.
2.3.4. Mode opératoire
a) Filtration et conservation
- Dès le retour au laboratoire on a fait la filtration de chaque échantillon et on ajoute quelques
gouttes de MgCO3 sur le filtre.
- Le filtre est plié en quatre et enrobé dans du papier aluminium préalablement étiqueté.
- Mettre les filtres dans le congélateur pour une analyse ultérieure.
b) Extraction des pigments
On enveloppe les tubes dans une feuille d’aluminium.
- Introduire le filtre dans un tube à centrifuger et ajouter 10 ml d’acétone 90%
- Déchiqueter le filtre à l’aide d’une baguette ou d’un tube de verre, boucher et agiter pour
disperser les fibres.
- Laisser l’extraction se poursuivre 24h au réfrigérateur dans l’acétone.
- Laisser refroidir à température ambiante.
- Centrifuger 1 min, pour faire tomber les fibres de verres.
- Centrifuger à nouveau 5 à 10 min a 3000-4000 tr/min (les tubes doivent rester boucher pour
éviter l’évaporation).
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l’absorbance de l’extrait a une ou plusieurs longueur d’onde avant et après acidification si l’on
recherche également les formes dégradées (Aminot et Chausse-pied ,1983).
2.3.2. Matériels et appareillages
- Dispositif de filtration et des filtres GF/F 0,7 μm de porosité.
- Tubes de dosage de 10ml,
- Centrifugeuse Sigma (Figure 3.8, annexe2).
- Spectrophotomètre ultraviolet a double faisceaux de type UV-1800, SHIMADZU
(Figure 3.9, annexe2).
- Matériels courant de laboratoire.
2.3.3 Réactifs
- Suspension carbonate de magnésium MgCO3 à 1%.
- Solvant d’extraction : l’acétone 90%.
2.3.4. Mode opératoire
a) Filtration et conservation
- Dès le retour au laboratoire on a fait la filtration de chaque échantillon et on ajoute quelques
gouttes de MgCO3 sur le filtre.
- Le filtre est plié en quatre et enrobé dans du papier aluminium préalablement étiqueté.
- Mettre les filtres dans le congélateur pour une analyse ultérieure.
b) Extraction des pigments
On enveloppe les tubes dans une feuille d’aluminium.
- Introduire le filtre dans un tube à centrifuger et ajouter 10 ml d’acétone 90%
- Déchiqueter le filtre à l’aide d’une baguette ou d’un tube de verre, boucher et agiter pour
disperser les fibres.
- Laisser l’extraction se poursuivre 24h au réfrigérateur dans l’acétone.
- Laisser refroidir à température ambiante.
- Centrifuger 1 min, pour faire tomber les fibres de verres.
- Centrifuger à nouveau 5 à 10 min a 3000-4000 tr/min (les tubes doivent rester boucher pour
éviter l’évaporation).