Chapitre 3 : Matériel et méthodes
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2.5 Protocole d'extraction des hydrocarbures dissous /disperses
2.5.1 Extraction
Le procédé d'extraction adopté est celui décrit par Roussel et Marchand (1983).
L'extraction des échantillons doit être pratiquée dès que possible après le prélèvement (il faut
ajouter «in situ» 50 ml de l’hexane et agiter pendant 3 minutes pour chaque échantillon). En
principe, elle doit être effectuée en mer si les conditions et l'espace disponible le permettent.
Sinon, elle doit être faite dès que le navire arrive à terre. Les échantillons ne doivent en aucun
cas être conservés plus de trois à quatre heures avant l'addition de solvant et ils doivent être
gardés au frais et dans l’obscurité (COI, 1984).
Une seconde extraction est réalisée au laboratoire avec 50ml d’hexane. Et comme ce dernier
est un solvant organique plus léger que l’eau, au moment de l’agitation il permet la dispersion
du solvant dans l’eau de mer et la formation d’une phase organique non miscible, piégeant ainsi
les hydrocarbures présents dans l’eau. Cette extraction se fait par agitation mécanique dans une
ampoule à décanter pendant 10 minutes. Après décantation, la phase organique supérieure de
l’ampoule est récupérée dans un erlenmeyer à col rodé. Une pincée de sulfate de sodium
(Na2SO4) anhydre est ajoutée afin d'absorber d'éventuelles traces d'eau dans l’extrait.
Figure 12: Agitateur mécanique
2.5.2 Concentration de l’échantillon
La concentration de l’extrait d’eau de mer est réalisée dans le but d’éliminer le solvant
d’extraction à l’aide d’un évaporateur rotatif. L'échantillon donc est concentré jusqu'à un
volume d'environ 5ml au bain Marie à une température voisine de 40°C. Cette température est
uniquement nécessaire à l’évaporation du solvant. L'échantillon est placé dans un évaporateur
rotatif BUCHI R110 muni d'un thermostat. Ce dispositif est raccordé à une pompe aspirante
d'une étanchéité au vide inférieure à 1 torr soit à 1,3 millibar. La concentration est une étape
intermédiaire qui permet de diminuer le volume du contenant (solvant) dans l’échantillon et de
travailler ainsi avec-des volumes réduits et manipulables.
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