Chapitre 6:
partie expérimentale
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résidu (échantillon épuisé au 3éme au 4éme lavage).
-le mélange est transvasé dans une ampoule à décanter avec l’ajout de 25 ml d’hexane
et 20 ml d’eau distillée. Puis bien agité manuellement pendant une minute.
-après décantation on obtient deux phases distinctes: Phase organique (phase
supérieure); phase aqueuse (phase inferieure).voir annexe 1 photo n
0 10
-la phase aqueuse est réextraite 2 à 3 fois de suite par 40 ml de solvant éthanol-hexane
(1:1) afin d’en extraire toute trace de caroténoïdes contenue.
-après ajout de Na 2 SO 4 à la phase organique recueillie (pour éliminer les molécules
d’eau existantes), on filtre cette dernière.
-Le filtrat obtenu est évaporé à sec à l’aide d’un rotavapeur à 40 C
0 , sous vide, afin
d’obtenir notre fraction de caroténoïde exempte en solvant. Enfin pour de récupérer
notre extrait, on ajoute 5 ml d’éthanol, et en conserve au frais. L’extrait solubilisé dans
l’éthanol est envoyée ensuite pour l’analyse.
-analyse par spectrophotomètre. (détermination de la langueur d’onde et l’absorbance).
-le concentré de l’échantillon est mis dans un HPLC pour déterminer leurs absorbances
est donc déterminer leur teneurs en caroténoïdes.
4.1.3. Extraction à l’éthanol pur :
Il s’agit du même protocole d’extraction que le précédent, par macération, on change
uniquement le solvant d’extraction de manière que le mélange (1 :1) soit remplacé par
l’éthanol pur.