Chapitre 5:
Méthodes d’indentification des caroténoïdes
33
1
.
1. Méthodes d’identification des caroténoïdes
Nous pouvons citer les différentes techniques d’identification :
1. chromatographie liquide à haute performance, qui fait l’objet de notre travail.
2. chromatographie d’absorption sur colonne.
3. chromatographie sur couche mince.
2. Chromatographie liquide a haute performance (HPLC):
High performance liquid chromatography, Ou haute résolution; haute pression; sont
les même noms que ceux qui sont utilisés dans la Chromatographie sur échangeur
d’ions ou la chromatographie par exclusion (diffusion). Elle constitue une technique
de séparation très générale d’emploi. Elle correspond à une évolution de la
chromatographie préparative sur colonne dont les performances (éfficacité, facteur de
résolution, donnés d’analyse) se sont trouvées grandement améliorées par l’utilisation
d’une haute pression et de phases stationnaires très élaborées.
L’échantillon doit être totalement soluble dans la phase mobile qui sera appelé :
solvant d’élution ; celui-ci doit être passé à haute pression afin d’assurer un débit constant
dans la colonne et y éviter toute perte de charge.
La chromatographie liquide à haut performance classique fait intervenir des
mécanismes d’échange soluté /phase mobile /phase stationnaire basés sur les coefficients de
partage ou d’absorption selon la nature des phases présente.
La détection fait appelle à une spectrophotométrie UV/visible à langueur d’onde
variable ou encore à des appareillages à barrette de d’iode permettant des analyses spectrales
en trois dimensions et aussi de vérifier la pureté de chaque pic.
-le choix d’un étalon interné satisfaisant demeure une difficulté lorsqu’on veut passer à une
analyse quantitative des constituants de l’échantillon à analyser.
Méthodes d’indentification des caroténoïdes
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1. Méthodes d’identification des caroténoïdes
Nous pouvons citer les différentes techniques d’identification :
1. chromatographie liquide à haute performance, qui fait l’objet de notre travail.
2. chromatographie d’absorption sur colonne.
3. chromatographie sur couche mince.
2. Chromatographie liquide a haute performance (HPLC):
High performance liquid chromatography, Ou haute résolution; haute pression; sont
les même noms que ceux qui sont utilisés dans la Chromatographie sur échangeur
d’ions ou la chromatographie par exclusion (diffusion). Elle constitue une technique
de séparation très générale d’emploi. Elle correspond à une évolution de la
chromatographie préparative sur colonne dont les performances (éfficacité, facteur de
résolution, donnés d’analyse) se sont trouvées grandement améliorées par l’utilisation
d’une haute pression et de phases stationnaires très élaborées.
L’échantillon doit être totalement soluble dans la phase mobile qui sera appelé :
solvant d’élution ; celui-ci doit être passé à haute pression afin d’assurer un débit constant
dans la colonne et y éviter toute perte de charge.
La chromatographie liquide à haut performance classique fait intervenir des
mécanismes d’échange soluté /phase mobile /phase stationnaire basés sur les coefficients de
partage ou d’absorption selon la nature des phases présente.
La détection fait appelle à une spectrophotométrie UV/visible à langueur d’onde
variable ou encore à des appareillages à barrette de d’iode permettant des analyses spectrales
en trois dimensions et aussi de vérifier la pureté de chaque pic.
-le choix d’un étalon interné satisfaisant demeure une difficulté lorsqu’on veut passer à une
analyse quantitative des constituants de l’échantillon à analyser.